25. Průkaz lipidů v játrech. Montovací média a jejich výběr

25. Průkaz lipidů v játrech.
Montovací média a jejich výběr

Průkaz lipidů v játrech
1) Destilovaná voda – oplach
2) Oplach 50% alkoholem
3) Olejová červeň nebo sudanová modř – 15 – 30 min
4) (oplach 50% alkoholem), dest. voda
5) Dobarvení jader Harrisovým hematoxylinem (u olejové červeně) – 10 min, oplach ve vodě (modrání jader)
jádrová červeň (sudanová modř) – 10 min, oplach v dest. vodě
6) montování do glycerinové želatiny

VÝSLEDEK BARVENÍ
Tuk – červeně (olejová červeň)
černě (sudanová čerň)
Jádra – modře (hematoxylin)
červeně (jádrová červeň)

Montovací média a jejich výběr
Obarvené řezy montujeme mezi podložní a krycí sklíčko do montovacího média. Montovací médium musí být látka dokonale průhledná, nesmí poškozovat zbarvení tkáně a musí mít vysoký index lomu světla.
Dělí se do dvou skupin:
1. Nerozpustné ve vodě
- do těchto medií se řezy nemohou montovat přímo, nejprve se musí odvodnit v alkoholu a karbolxylenu a projasnit v xylenu
a) Kanadský balzám – pryskyřice kanadské jedle, hustý sirupovitý roztok, pokud je příliš hustý ředí se xylenem, pH má být neutrální; viskozita taková, aby se snadno odstranily vzduchové bubliny a současně, aby médium vtékalo mezi krycí a podložní sklo; tuhne delší dobu
b) Solakryl BMX – vyráběn synteticky, dodáván v tekoucím stavu, rozpustný v xylenu; montování může být buď s použitím krycího skla nebo bez použití krycího skla; preparát vyjmeme z kyvety s xylenem, otřeme přebytečný xylen a ještě vlhký řez překryjeme solakrylem, který zaschne do 10 minut a úplně ztvrdne do 30 minut
c) Entellan firmy MERCK – pro preparáty vyžadující přísně neutrální prostředí
d) Pertex
e) Merkoglass – tekuté krycí sklo (cytologie)

2. Rozpustné ve vodě
- řezy uzavíráme přímo z vody bez odvodnění; např. průkaz lipidů a enzymů
a) Glycerinová želatina – za pokojové teploty pevného skupenství před použitím ji rozpustíme na vodní lázni
b) Sirup z arabské gumy (Apáthyho sirup) – před použitím rozpustíme na vodní lázni; nevýhoda: při montování vzniknou snadno vzduchové bubliny
c) Levulózový sirup – levulóza se rozpustí v dest. vodě, odpařuje se na vodní lázni, až nabude konzistence hustého sirupu
d) Glycerin – nevýhoda: snadno dojde ke stržení krycího skla a preparáty poměrně brzy vyschnou