Hledejte v chronologicky řazené databázi studijních materiálů (starší / novější příspěvky).

SPRÁVNOSŤ

SPRÁVNOSŤ
- Je definovaná ako zhoda medzi výsledkom merania a skutočnou hodnotou (BIAS merania). S očakávanou hodnotou (skutočnú) sa nemôže porovnávať len jedno stanovenie pretože môže byť zaťažený náhodnou chybou. Porovnáva sa očakávaná hodnota x0 s aritmetickým priemerom merania opakovaných s kontrolnou vzorkou (x). Nesprávnosť vyjadrujeme ako absolútnu chybu: BIAS = x - x0.
Nesprávnosť metódy býva spôsobená systematickú chybou pri analýze (zle nastavená pipeta, nesprávna inkubačná teplota, atď) a odchyľuje výsledok vždy jedným smerom. Okrem absolútnej chyby sa počíta chyba relatívna:
Relatívna chyba =

(výsledok opäť buď v relatívnych dielach alebo x 100 av%)

Vzťah presnosti a správnosti:
CITLIVOSŤ - niekedy sa vyjadruje ako tzv medza stanoviteľnosti, čo je najnižšia hodnota, ktorá sa štatisticky významne líši od slepej skúšky. Medzi najcitlivejšie metódy patria metódy imunochemickou napr. RIA, EIA

Špecifickosť

Špecifickosť
- Vyjadruje ako je stanovenie určitej látky ovplyvnené látkami inými prítomnými v biologickom materiáli. Vplyv týchto látok sa označuje ako interference. Výsledok môže byť ovplyvnený do plusu = falošná pozitivita alebo do mínusu = falošná negativity. K najčastejším interferujícím látkam patria lieky vrátane vitamínov.

KONTROLA KVALITY
K povinnostiam každého laboratória patrí vykonávať pravidelnú kontrolu analytickej spoľahlivosti vyšetrovaných metód. Jedná sa o kontrolu vnútornej = interné, hedgovanú samotnú laboratórií a vonkajšie = externé, ktorú zabezpečuje nezávislý kontrolný orgán. Hodnotením vnútornej kontroly kvality je poverený pracovník laboratória. Táto kontrola spočíva v hodnotení presnosti - reprodukovateľnosti (v sérii v čase) a správnosti analýzy. Kontrola presnosti v čase znamená, že s každou skupinou vzoriek sa vyšetruje aj kontrolný materiál. Jeho koncentrácia nemusí byť známa, ale namerané hodnoty sa musia čo najmenej odlišovať od dlhodobého priemeru. Z výsledkov sa zostavuje tzv regulačné graf

Kontrola správnosti

Kontrola správnosti
Kontrola správnosti sa vykonáva pomocou komerčne vyrábaných kontrolných sér s atestem teda s presne deklarovaným rozmedzím, v ktorom sa má koncentrácia pohybovať.

Externá kontrola kvality má za úlohu zabezpečiť takú kvalitu práce jednotlivých laboratórií, aby ich výsledky boli porovnateľné. Na základe výsledkov externej kontroly kvality sa laboratóriám prideľuje osvedčenie (licencie) na vykonávanie jednotlivých metód. Je organizovaná na úrovni štátu (u nás sekka systém externej kontroly kvality) alebo na nadnárodnej úrovni (v rámci EÚ).
K zásadám externé kontroly kvality patrí zvyčajne použitie dvoch kontrolných vzoriek - jedného s fyziologickými a jedného s patologickými hodnotami sledovaných látok. Testuje sa správnosť.
Systém vnútornej i vonkajšej kontroly kvality je súčasťou tzv správnej laboratórnej práce SLP - jedná sa o celú organizáciu prevádzky laboratória od preanalytických postupov, cez vlastnú analýzu na vydanie výsledkov. Všetko musí prebiehať podľa štandardných postupov.

ELFO typ akútneho zápalu:

ELFO typ akútneho zápalu:
Tento ELFO typ nájdeme u akútnych zápalových ochorení, ale aj úrazov, operácií au všetkých akútnych stavov ako je napríklad akútny infarkt myokardu. K miernemu zníženiu albumínu dochádza vplyvom jeho degradáciou = katabolizmu.
Zvýšenie α1, α2, β globulínov spôsobuje nárast bielkovín akútnej fázy zápalu, ktoré vznikajú pôsobením interleukín av pečeni (α1 - antitrypsín, orosomukoid, CRP).

ELFO typ chronického zápalu:
Tento ELFO typ nachádzame nielen u chronických zápalových ochorení ale iu iných chronických chorôb (zhubné nádory, ochorenia spojiva a kĺbov, autoimunitné ochorenia atď). výrazné zníženie albumínu je spôsobené jeho katabolizmom a zníženú syntézou. Polyklonálne hyperimunoglobulinémie je spôsobená postupnou tvorbou rôznych druhov Ig v priebehu choroby.

Elektroforézou BIELKOVÍN

Elektroforézou BIELKOVÍN
Dáva podrobnú informáciu o zložení bielkovinového spektra. Najčastejšie sa vykonáva v sére (ďalej v moči, likvidēti). Vychádza z charakteristiky bielkovín pohybovať sa v jednosmernom elektrickom poli v závislosti na veľkosti svojho náboja. Pretože u bielkovín pri fyziologickom pH krvi prevažuje záporný náboj pohybujú sa od zápornej katódy ku kladnej anódy. ELFO môže prebiehať na rôznych nosičoch (papier, agar, agarového, Polyakrylamidový gél). V súčasnosti sa uprednostňuje delenie na agarového.
Po skončení ELFO delenia sa doštička zafixuje a zafarbia a nasleduje vyhodnotenie. To môže byť vizuálne alebo pomocou denzitometer - Denzitometrický krivka.
Bielkovinové spektrum sa rozdelí na frakcie: albumín (obsahuje len jednu bielkovinu). α1, α2, β, γ globulíny. Každá globulínová frakcia obsahuje niekoľko bielkovín, ktoré v prípade potreby môžeme kvantifikovať imunochemickou. Za patologických okolností sa niektoré z frakcií môžu zvyšovať alebo znižovať. Podľa toho rozoznávame niekoľko tzv elektroforetických typov. Podľa výsledkov ELFO teda nemôžeme presne stanoviť diagnózu, môžeme len zaradiť ochorenia do skupiny príbuzných chorobných stavov.

ELFO typ pri chronickej hepatopatii:

ELFO typ pri chronickej hepatopatii:
Tento ELFO typ sprevádza napríklad cirhózu pečene. Typické je zníženie syntézy prakticky všetkých bielkovín v pečeni a vznik β - γ mostíku, čo je spojenie posledných dvoch globulínových frakcií spôsobené zvýšením koncentrácie Ig A.

ELFO typ pri malnutrici (= podvýživa):
Pri podvýžive, kedy je nedostatok AMK klesá syntéza predovšetkým albumínu a β - globulínov (transportnej bielkoviny - napr transferin). Hladina α1 a α2 globulínov zostáva normálne za účelom zachovania onkotického tlaku v cievach.

FYZIOLOGICKÉ ZMENY

1. u novorodencov a dojčiat - placentu prechádza len Ig G z krvi matky do krvi dieťaťa. Jeho koncentrácia v krvi dieťaťa po pôrode prudko klesá. Tvorba vlastných Ig začína až od 6 mesiaca veku. Pre novorodencov a dojčatá je teda typická hypogamaglobulinémie a zároveň sa u nich nie úplne jasných príčin zvyšuje tvorba bielkoviny α2 - makroglobulínu.

ELFO typ monoklonálna hyperimunoglobulinémie (monoklonálne deformácia):

ELFO typ monoklonálna hyperimunoglobulinémie (monoklonálne deformácia):
Tento typ ELFO nachádzame u zhubného ochorenia plazmatických buniek kostnej drene (plazmocytom, plazmocytární mydlím, Kahlerova choroba). Podstatou ochorenia je produkcia Ig jedného druhu (= klonu).
Ďalšími prejavy ochorenia sú zlomeniny kostí, zvýšená Ca v krvi s tendenciou k tvorbe kameňov, anémia, poškodenie obličiek.

ELFO typ pri nefrotický syndrómu:
Nefrotický syndróm znamená poškodenie glomerulárního filtra so zvýšenou priepustnosťou bielkovín do moču. Provází také ochorenia ako diabetes mellitus, chronické zápaly obličiek (chronická glomerulonefritis) ale aj ochorenia spojivového tkaniva a kĺbov. Pre tento ELFO typ je charakteristický výrazný pokles albumínu a malých bielkovín v α1 - globulinové frakcii. Kompenzatorně sa v krvi zadržujú bielkoviny s veľkou molekulou napr. α2 - makroglobulínu a
β - lipoproteid.

FYZIOLOGICKÉ ZMENY

FYZIOLOGICKÉ ZMENY
2. u tehotných žien v posledný tretine tehotenstva - na konci tehotenstva sa významne zvyšuje objem telesných tekutín ženy a to má za následok relatívne zníženie koncentrácie niektorých zložiek krvi napr. albumín. Dochádza k tzv hemodiluci (riedenie krvi). Zároveň sa zvyšuje syntéza bielkovín akútnej fázy zápalu ako odpoveď na záťaž materského organizmu. Zvyšuje sa aj syntéza transportných bielkovín napr transferinu, ktorými žena zásobuje aj plod.

3. pri spracovaní plazmy - plazma na rozdiel od séra obsahuje faktory zrážania krvi (hlavne fibrinogén). Fibrinogén sa na ELFO krivke prejaví ako hrotnatý vrchol medzi β a γ globulíny (nezaměnit s paraproteinem!!!)
Ak spracovávame hemolytická sérum objaví sa na ELFO krivke netypický vrchol medzi α2 a β globulíny - je spôsobený Hb-haptoglobinovým komplexom ..

VITAMÍNY

VITAMÍNY
Sú to biokatalyzátory chemických dejov. Majú rôznu štruktúru av organizme sa vyskytujú len v stopových množstvách. Až na malé výnimky si je ľudské telo nedokáže vyrobiť. Sú prijímané hotové s potravou alebo vo forme provitamíny.
Základné delenie je podľa rozpustnosti na vitamíny:
- Rozpustné v tukoch (A, D, E, K)
- Rozpustné vo vode vitamíny skupiny B, vitamín C

Nedostatok vitamínu sa označuje ako hypovitaminóza. Úplné chýbania je avitaminóza. Nadbytok = hypervitaminóza.
Nedostatok môže byť spôsobený nedostatočným prísunom v potrave alebo poruchou vstrebávania (pri zápaloch GIT), zvýšenou potrebou (tehotenstva vysoké teploty), zvýšenými stratami (pri hnačkách), dlhodobú parenterálnu výživou bez pridania vitamínov, užívanie liekov, ketré pôsobí ako tzv antivitaminy (Pelentan , Warfarín - blokujú účinky vitamínu K)

Pri záťaži

Pri záťaži
Pri záťaži dochádza k zmene koncentrácie určitých bielkovín, ktoré označujeme ako reaktanty akútnej fázy zápalu. Syntéza pozitívnych reaktanty pri záťaži rastie, zatiaľ čo negatívne reaktanty sú intenzívnejšie odstraňujú. Medzi pozitívne reaktanty patrí väčšina bielkovín z α1 a α2 globulínových frakcií (α1 - antitrypsín, orosomukoid, haptoglobin, CRP). Medzi negatívne reaktanty patria napríklad prealbumin, albumín, transferin).

Vitamín D

Vitamín D
- Cholekalciferol (u živočíchov)
- Ergokalciferol (u rastlín)

Patrí k vitamínům, ktoré si organizmus dokáže vytvoriť napríklad z cholesterolu pôsobením UV žiarenia a následne dvojaký hydroxylácia steroidního jadra v pečeni a obličkách. Časť vitamínu D je prijímaná potravou v rybom tuku, masle, mlieku, kvasniciach a žloutkách. I takto prijímaný vitamín D vo forme cholekalciferolua ergokarciferolu podlieha dvojitej hydroxylácia.
Vzniknutý kalcitriol ovplyvňuje metabolizmus vápnika - zvyšuje hladinu ionizovaného kalcia v sére.
Nedostatok kalcitriol v období rastu kostry vedie k deformáciám kostry, ktoré sa označuje ako křivice = RACHITIS. Tiež je porušená tvorba zubov.
V súčasnej dobe sa deťom podáva vitamín D v kvapkách v 3. týždni a 3. - 4. mesiaci života.

Vitamíny rozpustné v tukoch

Vitamíny rozpustné v tukoch
Vitamín A = retinol, axeroftol
Je prijímaný potravou priamo alebo vo forme provitamíny betakaroténu.
Zdrojom je vaječný žloudek, mlieko, maslo, mrkva, paprika, kel, hrach, špenát, šípky, čučoriedky, marhule, banány a pečeňové tkanivo
Hydrolýzou betakaroténu v čreve vznikajú 2 molekuly vitamínu A, ktoré sa resorbují alebo dôjde k vsakovania samotného betakaroténu a následné hydrolýze.
Dostatočná hladina betakaroténu v krvi je tiež ukazovateľom neporušeného vstrebávanie lipidov. Transport vitamínu A v krvi je zabezpečený bielkovinou RBP (retinol binding protein)
Vzhľadom k tomu, že sa jedná o pomerne malú molekulu, ktorá prejde okami glomerulárního filtra, viaže sa ešte na prealbumin. Komplex vitamín A - RBP - prealbumin už glomerulárním filtrom neprojde.
Vitamín A je súčasťou tzv očného purpure, bráni šeroslepota. Je dôležitý pre správne formovaní pokožky a správnu funkciu slizníc. Pôsobí aj proti vzniku voľných kyslíkových radikálov a zúčastňuje sa snad iv prevencii zhubných nádorov.
U malých detí pri veľkom prísune betakaroténu v mrkve dochádza k osobitnému žlutohnědému nádychu pokožky, čo sa označuje ako karotinémie alebo karoténovej ikterus alebo bronzový ikterus. Nejedná sa o trvalé ochorenie - po znížení prísunu betakaroténu v potrave bronzový nádych pokožky pomaly zmizne.

Vitamín E = tokoferol

Vitamín E = tokoferol
Je obsiahnutá v zelenine, obilných klíčkoch, orechoch a vajciach. Má antioxidačné (bráni vzniku toxických zlúčenín kyslíka), bráni rozvoju inkrustácie tepien, je dôležitý pre tvorbu spermií a plodnosť, podporuje fyziologickú tvorbu a funkciu svalov a nervov.
Nedostatok vitamínu E sa prejaví lámavosť nechtov a vlasov a poruchami krvotvorby.

Vitamín K = menadiol
Protikrvácivý vitamín, dôležitý pre tvorbu protrombínu a koagulačný faktor VII, IX, X v pečeni. Zúčastňuje sa aj na tvorbe kostí.
Zdrojom vitamínu K: zelenina - špenát, kapusta, paradajky, karfiol, jahody, mlieko, pečeň.
Najčastejšie príčinnú nedostatku vitamínu K sú hnačky a liečba protisrážlivými lieky Pelentan a Warfarín).

Pyridoxín (B6)

Pyridoxín (B6)
Je koenzýmom transferázy (AST, ALT). Pôsobí na periférne nervy a sliznice.

CYANOKOBALAMIN (B12)

Je dôležitý pre tvorbu NK a jeho nedostatok sa prejaví perniciozní (zhubné) anémiou.

KYSELINA LISTOVÁ

Jej nedostatok je príčinnú vzostupu hladiny homocysteínu, čo je AMK, ktorá je považovaná za jeden z rizikových faktorov rozvoja aterosklerózy. Vyskytuje sa v listovej zelenine, obilninách a pečeni.

KYSELUNA pantoténová
NIACÍN
BIOTÍN

Vitamín C = kyselina askorbová

Je to významný antioxidant. Zdrojom sú ovocie a zelenina.

Vitamíny rozpustné vo vode

Vitamíny rozpustné vo vode
Vitamíny skupiny B
Zdrojom sú strukoviny, kvasnice, tmavé pečivo, mäso, mlieko, ryža.
Väčšinou pôsobia ako koenzýmu enzýmov. Sú dôležité pre správnu funkciu nervovej sústavy. Na formovaní slizníc v ústnej dutine a ich nedostatok spôsobuje zápalové zmeny na slizniciach alebo poruchy tvorby pokožky. Sú tiež dôležité pre tvorbu NK.

TIAMÍNU (B1)

Dôležitý pre energetický metabolizmus a jeho spotreba stúpa pri zvýšenom odbúravanie glycidov. Jeho nedostatok spôsobuje depresie a poruchy pamäti, ochorenie periférnych nervov, ktorého ťažká forma sa označuje ako choroba beri - beri.

Riboflavin (B2)

Jeho nedostatok sa prejaví afty v ústnej dutine a aj kožnými zmenami ako je odlupovanie pokožky.

Antisérum

Antisérum
Antisérum môže byť monovalentná (s 1 Ab) alebo polyvalentnej (obsahuje Ab proti niekoľkých Ag súčasne). Reakcií Ag a Ab vznikne komplex Ag-Ab. Ak je Ag rozpustený v roztoku je nekorpuskulární a vzniká precipitát. V roztoku sa precipitácie prejaví zahmlením av gelové prostredia sa prejaví zrazeninovú línií. Každá zrazeninovú línie zodpovedá 1 imunochemickou detekovateľné bielkovine krvného séra. Ku vzniku precipitátu je potrebná optimálna koncentrácia Ag aj Ab. Ak je Ag v prebytku vzniknutý precipitát sa opäť rozpúšťa. Prebytok Ab zvyčajne nevadí, výnimkou sú Ab v konských antisérom, ktoré tiež ruší tvorbu precipitátu (sú to napospol Ig, ktoré môžu byť súčasne aj Ag.
Reakcie Ag s Ab je tiež ovplyvnená teplotou, pH, druhom pufra a prítomnosťou bielkovín, ktoré do reakcie nevstupujú.
Reakcií Ab s korpuskulárním Ag (nadviazanej na bunky - např.ery) dochádza k aglutinácie - vznikajú viditeľná zrnká alebo vločky.
Imunochemickou reakcie môžu byť kvalitatívne = vylučujú alebo potvrdzujú prítomnosť Ag alebo kvantitatívne = stanovuje sa koncentrácia Ag.

ZÁKLADY IMUNOCHEMICKÉHO STANOVENIE

ZÁKLADY IMUNOCHEMICKÉHO STANOVENIE
Základom imunochemie je reakcia AG a AB za vzniku imunokomplexu Ag-Ab.
Ag = látka bielkovinovej povahy, na ktorej podnet vzniká v organizme Ab. Látka schopná vyvolať v živom organizme tvorbu špecifické Ab. Najčastejšie to je bielkovina, ale môže ísť aj o inú vysokomolekulární látku (glykoproteidy, mikroorganizmy, vírusy).
Táto látka sa ďalej označuje ako kompletné Ag. Tvorbu protilátok však môže vyvolať aj nekompletné Ag - hapten, ktorý sa naviaže na bielkovinový nosič. Heptenem sa môže stať napríklad liek, hormón, nízkomolekulárnych peptid atď najčastejšie sa viažu na albumín ale aj na iné transportné proteíny.
Ab = bielkoviny schopné naviazať sa na Ag, na ktorého podnet boli vytvorené. Najčastejšími Ab sú imunoglobulíny.
Sú obsiahnuté v antisérom, ktoré sa využívajú k preukazu Ag v laboratórnom prostredí. Antiséra sa získavajú pri tzv imunizáciu zvierat, keď sa do krvi zvieraťa vmiešajú Ag a ten vyvolá tvorbu príslušných Ab. Vzniknuté Ab sa potom izolujú z krvi zvieraťa.

KVALITATÍVNE imunochemickou METÓDY

KVALITATÍVNE imunochemickou METÓDY
Imunoelektroforéza - jedná sa o kombináciu imunochemickou reakcie s elektroforézou na agare alebo agarózy. Z agarózový doštičky vyberieme časť agarózy v podobe pozdĺžneho obdĺžnikové žliabku a okrúhleho startu.na start nanesieme vyšetrovaný biologický vzorku a doštičku umiestnime do prostredia jednosmerného elektrického poľa. Prebieha elfo delenie bielkovín vzorky. Vzhľadom k okrúhlemu tvaru štarte majú jednotlivé frakcie tvar elipsy. Delenie prebieha od katódy a kanodě s výnimkou gama-globulínov, ktoré putujú od štartu opačným smerom - je to vplyvom javu, ktorý nazývame endoosmóza a je spôsobený pohybom častíc pufra, ktoré rúcajú gama-globulín. Po skončení elfo delenie umiestnime do vopred pripraveného pozdĺžneho žliabku v agarózy polyvalentnej sérum - obsahuje Ab proti proteínom, ktoré sa rozdelili pri ELFO. Doštičku umiestnime do vlhkého prostredia. Nasleduje protibežných difúzie bielkovín z vyšetrovaného vzorky a Ab z antisér. Po dosiahnutie optimálnej koncentrácie oboch týchto faktorov vznikajú na doštičke zrazeninovú línia. Ich umiestnenie a mohutnosť závisí od koncentrácie Ag vo vzorke. Zrazeninovú línie sa hodnotí po zafarbenie a fixáciu.

Citlivosť imunochemických metód

Citlivosť imunochemických metód
Citlivosť imunochemických metód je vysoká a dá sa ešte zvýšiť založením tzv značky na Ag alebo Ab. Značkou môže byť napríklad rádioaktívny izotop, enzým, fluoreskujúce látky, čiastočky kovov apod Mluvíme pak o RIA, EIA. Princípom týchto metód je kompetice (= súťaž) značeného a neznačeného Ag o voľné miesto na Ab.
Vysoká citlivosť imunochemických metód umožňuje stanovovať aj veľmi nízke koncentrácie v telesných tekutinách (hormóny, vitamíny, lieky atď)
Okrem kompetitívna metód existujú aj nekompetitivní = sendvičové techniky, keď je hľadaný Ag naviazaný do komplexu medzi dvoma Ab (značkovanou a neoznačenou).

Protibežných imunoelektroforéza

Protibežných imunoelektroforéza
- Na agarózový doštičke vytvoríme dvojice jamiek. Do otvorov, ktoré sú bližšie katóde, nepipetujeme vzorka s hľadaným Ag a do otvorov bližšie anódy nepipetujeme monovalentná antisérum s Ab proti hľadané bielkovine. Doštičku umiestnime do prostredia jednosmerného elektrického poľa. Ag zo vzorky sa pohybuje smerom ku kladne nabitej anódy a Ab z antisér vplyvom elektroendoosmózy smerom opačným. V mieste kde sa stretnú vznikne zrazeninovú línie.
Dvojitá radiálna imunodifúzia - na agarózy vytvoríme niekoľko otvorov, z ktorých jeden je centrálna. Do centrálneho otvoru nepipetujeme monovalentná antisérum a do okolitých otvorov biologický materiál. Doštičku umiestnime do vlhkého prostredia. Z centrálneho otvoru difunduje do agarózy Ab a stretáva sa s Ag zo vzorky - vzniká zrazeninovú línie.

KVANTITATÍVNE imunochemickou METÓDY

Jednoduchá radiálna imunodifúzia - na povrchu doštičky je agarového zmiešaná s monovalentním antisérom. Na povrchu doštičky sa vytvorí niekoľko otvorov, do ktorých nepipetujeme biologický materiál. Pri Difúzia sa Ag zo vzoriek v agarózy stretáva s Ab a po dosiahnutie optimálnej koncentrácie sa vytvorí zrazeninovú línia v tvare kruhu. Veľkosť kruhu je závislá na koncentrácii Ag a porovnáva sa so štandardnými vzorkami.

EIA - Enzymoimunoanalýza

EIA - Enzymoimunoanalýza
- Značkou je enzým napr. peroxidáza, glokózooxidáza, ALP, 3 - galaktóza alebo glukózo-6-fosfátdehydrogenáza. Existujú 2 možné postupy Konkurenčným a NEKOMPETITIVNÍ (sendvičové).
Konkurenčným: a) homogénna - emit
b) heterogénna - elisa

Emit - pri tomto postupe stráca značený Ag vazdou na Ab svoju enzymatickú aktivitu. Odpadá teda oddeľovanie vzniknutých komplexov od nezreagovaných Ag. Enzymatickú aktivitu v tomto prípade vykazujú len voľné značeného Ag. Čím vyššia e enzýmová aktivita obsahu skúmavky tým viac bolo neznačeného Ag. Najčastejšie sa na značenie užíva enzýmu glukózo-6-fosfátdehydrogenázy.

ELISA - najčastejšie využíva enzýmy peroxidázu a ALP. Tvorbou komplexu sa nezablokuje enzýmová aktivita. Na hodnotenie je teda potrebné oddeliť komplexy od voľných nezreagovaných Ag. Hodnotenie rovnaké ako u RIA.

Elektroimunoprecipitace (raketová metóda)

Elektroimunoprecipitace (raketová metóda)
- Ab je opäť v agarózy, u spodného okraja doštičky si vytvoríme niekoľko otvorov (blíž katóde). V jednosmernom elektrickom poli dôjde k pohybu Ag od - k + a Ag sa zároveň stretne s Ab v agarózy. Vytvorí sa zrazeninovú línie v tvare rakety. Jej výška sa porovná so štandardným roztokom.

Imunoprecipitace v roztoku - prejaví sa tvorbou zákalu, ktorý sa hodnotí nefelometricky (meria sa odrazené svetlo) alebo turbidimetricky (meria sa svetlo, ktoré prešlo roztokom)

RIA metóda - radioimunoanalýza - v roztoku je limitované množstvo Ab, hľadaný Ag a značený Ag rádioizotopov. Dochádza k vzniku komplexu Ag - Ab a značenýAg - Ab. Ich pomer je ovplyvnený vzájomným pomerom značeného a neznačeného Ag. Po obsadení všetkých voľných miest na Ab, zostanú v roztoku voľné značeného i neoznačenou Ag, ktoré je potrebné oddeliť od vzniknutých komplexov (centrifugáciou). Potom je možné zmerať rádioaktivitu supernatantu alebo sedimente. Čím je vyššia rádioaktivita supernatantu (je teda veľa voľných značených Ag), tým je aj vyššia koncentrácia hľadaného Ag. Čím vyššia je rádioaktivita sedimentu, tým menej hľadaného Ag bolo vo vzorke, pretože väčšinu väzbových miest na Ab obsadil značený Ag. Výhodou stanovenie je vysoká citlivosť, nevýhodou je vyššia finančná aj pracovná náročnosť (potreba spec. Meracieho prístroja a riziko práce s rádiooznačený s možnými zdravotnými následkami.

SENDVIČOVÉ TECHNIKA

SENDVIČOVÉ TECHNIKA
- Využíva 2 Ab z ktorých jedna je značená enzýmom. Neoznačenou Ab býva naviazaná na vnútornú stenu skúmavky. Po pridaní vzorky s hľadaným Ag dôjde k nadviazanie Ag na túto Ab. Obsah skúmavky sa vyleje, skúmavka sa vypláchne vodou a pridá sa enzýmom značená Ab, ktorá sa z druhej strany nadviaže na Ag. Zbylý obsah skúmavky sa opäť vylejú a skúmavka sa vypláchne. Enzymatická aktivita vzniknutého komplexu je mierou koncentrácie hľadaného Ag.
Nevýhodou je vysoká finančná náročnosť, výhodou vysoká citlivosť.

Laboratórne obraz RAC

Laboratórne obraz RAC
- Zvýšenie pCO2
- Znížené pH (u akútne poruchy)

Kompenzácia RAC
- Sa deje renálnou cestou: CO2 + H2O → H2CO3 → H + (do moču)
→ HCO3-(v krvi)

Respiračná ALKALÓZA
Príčinou je pokles pCO2 pod hodnotu 4,8 kPa = HYPOKAPNIE

Príčiny:
1. rýchle dýchanie pri hysterické záchvatu, úzkosti, strachu a bolesti
2. dráždenie dychového centra karcinómom, úrazom, zápalom alebo pôsobením liekov (salicyláty)
3. pri vysokých teplotách alebo ťažkom ochorení pečene keď v krvi kolují toxické metabolity, tiež pôsobiacou na dychové centrum

Respiračná PORUCHY ABR

Respiračná PORUCHY ABR
Respiračná acidózy
Príčinou je zvýšenie pCO2 nad hodnotu 5,8 kPa = HYPERKAPNIE

Príčiny:
1. útlm dychového centra v predĺženej mieche spôsobený karcinómom, zápalom, úrazom alebo účinkom liekov - sedatíva (Diazepam, Neurol), hypnotiká (Rohypnol)
2. ochorenia pľúc a priedušiek, zápaly a úrazy rebier, pohrudnice, medzirebrové svalov a nervov, vrodené deformity hrudníka, tuberkulóza, tekutina v pohrudnice dutine
3. zástava činnosti srdca a pľúc - dochádza nielen k vzostupu pCO2 ale ik poruche zásobenia tkanív kyslíkom a súčasne s RAC sa rozvíja aj MAC - laktátová acidózy typu A. jedná sa tdy o zmiešanú poruchu ABR.

Klinický obraz RAC
- Bolesť hlavy
- Poruchy zraku
- Poruchy vedomia - rôzne stupne

Klinický obraz RAL

Klinický obraz RAL
- Kŕče spôsobené nízkou koncentráciou ionizovaného Ca v krvi
- Závrat
- Poruchy vedomia

Laboratórne obraz RAL
- Zvýšené pH krvi
- Zníženie pCO2
Pre laboratórne obraz metabolických porúch sú charakteristické zmeny hodnôt HCO3-a BE.
Pre respiračné poruchy sú typické zmeny pCO2

Ľudský organizmus sa dokáže lepšie vysporiadať s acidózy ako s alkalózou je to spôsobené tým, že sa človek počas svojho vývoja skôr stretával so situáciami znižujúcimi pH krvi (ketoacidóza pri hladovanie, laktátová acidózy typu A pri extrémnej námahe).

Sliny

Sliny
- Je to sekrét slinných žliaz (podjazyková, podčeľustné, príušné)
- Uľahčujú žuvanie, prehĺtanie a artikulovaní.
Ich množstvo a zloženie závisí od druhu a zloženia potravy. Pri nedostatku tekutín sa tvorba slín znižuje a sucho v ústach prispieva k pocitu smädu. Tvorba slín je ovplyvnená podnety mechanickými, chemickými a nervovými.
Zloženie slín - základom je voda a minerály (K, Na, chloridy Ca, Li), ďalej sliny obsahujú THIOCYANÁT, ktorý má dezinfekčné účinky, NAF - bráni kazivosti zubov a súbor enzýmov, ktoré začínajú trávenie v ústnej dutine (amylase - začína štiepenie škrobu , ALP, ACP)
pH slín je 7 a vyššia. Po jedle pH prechodne klesá.

VYŠETROVANÍ Sekrety tráviaceho traktu, Stolica

VYŠETROVANÍ Sekrety tráviaceho traktu, Stolica
Funkcia GIT: - zabezpečuje komunikáciu vnútorného prostredia organizmu s prostredím vonkajším
- Zabezpečuje prívod vody, živín, E, stavebných látok atď
- Umožňuje vylučovanie odpadových a nevstřebatelných látok
- V GIT dochádza k peristaltice (posun tráveniny), na trávenie (lúhovanie) e ku vstrebávanie neboli resorpciu do krvi alebo lymfy. ciev
- Činnosť GIT je riadená nervovo a Humorálna (pomocou enzýmov a hormónov)
- Do GIT sa vylučuje veľké množstvo sekrétov: slín sa tvoria 1-1,5 litrov / deň
žal.šťávy 2-2,5 litrov / deň
duod.šťávy sa žlčou 3-3,5 litrov / deň
stolica 100-250ml/den

Žalúdočná šťava

Žalúdočná šťava
- Zloženie: základom je voda a ióny, ďalej enzým pepsín, HCl, gastrin-hormón, mucino-hlien

Pepsín je proteolytické enzým a vzniká z látky bielkovinového charakteru - pepsinogenu odčlenenie časti molekuly HCl. Pepsinogen je neúčinnú látkou, gastrin je tkanivový hormón, ktorý podporuje sekréciu HCl a vzniká v sliznici tej časti žalúdka, ktoré sa hovorí pylori.
pH žal.šťávy je 1-1,5 a je zabezpečené HCl

Riadenie sekrécie žal.šťávy: 1) neuropsychickými podnety - pomocou X.hlavového nervu (myšlienky na jedlo)
2) mechanické a chemické podnety - kúsky jedla, kofeín, nikotín, alkohol a tkanivové hormóny.

Zmes potravy a žal.šťávy sa označuje ako chymus.

Hodnotenie:

Hodnotenie:
zo získaných hodnôt sa počíta BaO = bazálnu sekrécie HCl = súčet výdaja HCl v štyroch porciách pred podaním pentagastrinu.
Fyz.hodnota je 1-5mmol/hod. Z ďalších 4 porcií sa počíta MAO = maximálna výdaj HCl. Fyz.hodnota 1-23mmol/hod

- Ak sú BaO aj MAO zvýšenej znamená to nadprodukciu HCl, najčastejšie pri ulcerózny chorobe. Zistením nízkych hodnôt znamená nedostatočnú tvorbu HCl a sprevádza chronický zápal žal.sliznice alebo rakovinu žalúdka.

Pentagastrinový test nahradil predtým vykonávané testy s histamínu a kofeínom, ktoré boli sprevádzané množstvom nežiaducich účinkov (zmeny tlaku, poruchy dýchania)

Žalúdočné šťavu je možné vyšetriť aj bez nasogastrické sondy, keď sa pacientovi ústami podajú Iónomeniče s navázaným farbivom. Tieto vysokomolekulární látky sú v žalúdku štiepené účinkom HCl. Odštiepenia farbivo sa dostane do krvi a do moču, kde ho preukazujeme.

Vzhľad žal.šťávy

Vzhľad žal.šťávy
- Za fyz.okolností je číra, bezfarebná a bez zápachu
- Pri krvácaní z vredu môže byť ružovkasté až červená
- Staršie krvácanie sa prejaví žltohnedá farbou
Rovnakú farbu má aj pri tzv regurgitaci - spätný tok obsahu dvanástnika do žalúdka (žlčové farbivá)
- Zelenkavá, vazky (s vysokým obsahom hlienu) je pri zápale žal.sliznice

Vyšetrovanie žal.šťávy = pentagastrinový test
Pentagastrin je synteticky pripravený tkanivový hormón gastrin, ktorý taktiež zvyšuje sekréciu HCl.
Vykonanie testu: pacient lačná 12hodin pred testom, potom mu je zavedená žal.sonda (najčastejšie nosom) = nasogastrická sonda. Sondou odčerpáva žal. šťavu 4x po 15minutách.Pak pacientovi aplikujeme pod kožu pentagastrin. Potom sa znovu odsává žal.šťáva 4x po 15minutách Potom sa môže test ukončiť. V získaných 8 porciách žal. šťavy hodnotíme vzhľad, pH, meriame objem s presnosťou na ml a titráciou stanovujeme koncentráciu HCl.

Vyšetrovanie duodenálnej šťavy

Vyšetrovanie duodenálnej šťavy
- Duodenálnej šťava sa skladá z viacerých zložiek:
1) pankreatické šťava - zložky: HCO3-, enzýmy (amylase, lipáza), proenzymy-bielkoviny je ešte nemôžu štiepiť (trypsín, chemotripsin, karboxypeptidáza)
2) Kel - HCO3-, žlčové kyseliny, lipidy, cholesterol, fosfolipidy, konjugovaný bilirubín, ALP
3) Sekrety vlastných duodenálnej žliaz

- Farba žltá, žltozelená (spôsobujú žlčové farbivá - bilirubín), má pH 8-9
- Základom duodenálnej šťavy je H2O. Dochádza v nej k štiepenie všetkých 3 základných živín a začína tu jej vstrebávanie. Za patologických okolností môže byť duodenálnej šťava bezfarebná pri neprítomnosti žlčových farbív (napr. pri uzáveru spoločného žlčovodu kameňom). Pri krvácaní v oblasti sliznice duodena môže byť šťava ružovkasté až červená.

Duodenálnej šťava sa vyšetruje v rámci vyšetrovania tzv žlučníkového reflexu, keď testujeme priechodnosť žlčových ciest a funkčnosť žlčníka.

Exokrinní funkcie pankreasu

Exokrinní funkcie pankreasu
Exokrinní funkcie pankreasu sa vyšetruje pomocou súpravy SPOFAGNOST PANKENZAN. Súprava obsahuje textační pokrm (bielkovina kazeín) a tzv acetyl-tyrosil-aminobenzoovou kyselinu (diagnostikum).

Vyhotovenie: - pacient 12 hodín lačná, potom sa mu ústami podá diagnostikum a testační pokrm. Kazeín vyprovokuje tvorbu chymotripsinu, ktorý rozštiepi bielkovinu, ale aj podanej diagnostikum. Z diagnostika vzniká p-aminobenzoová kyselina, ktorá sa preukazuje v moči. Podľa koncentrácia p-aminobenzoové kyseliny v moči posuzujeme funkčná zdatnosť pankreasu. V moči by sa malo objaviť viac ako 30% podanej kyseliny.
Pred spofagnostem pankenzan sa dělal sekretin-pankreoenzyminový test, keď sa tieto látky podávali injekčne a sondou sa získavala duodenálnej šťava s pankreatickými enzýmy.
Pri správnej funkcii pankreasu ich aktivita v priebehu testu stúpala. Test bol pre svoju náročnosť opustený. V súčasnej dobe nie je k dispozícii ani spofagnost pankenzan aj pri ochoreniach pankreasu sa stanovuje iba amylase aktivita a lipázy v sére prípadne u chronických zápalov podžalúdkovej aktivita elastázy v stolici.

Postup:

Postup:
pacient 12 hod lačná, potom sa mu zavedie nosom sonda do dvanástnika (v leže na pravom boku). Odčerpáva v kľude žltú, alkalickou duodenálnej šťavu. Potom podáme pacientovi stimulačnú látku, ktorá vyvolá stahy žlčníka. Obsah žlčníka s koncentrovanou žlčou sa vyprázdnia do duodena. malo by k tomu dôjsť do 25min od podania stimulačné látky. Vzhľad duodenálnej šťavy sa zmení na tmavo žltú až žltohnedá. Ak sa farba nezmení, žlčovody alebo žlčník sú upchaté kamene alebo karcinómom. Stimulační látkou môže byť
napr. olivový olej, ktorý sa podá pacientovi ústami alebo tzv cholecystokin, ktorý sa aplikuje injekciou do svalu.

Vyšetrovanie exokrinní funkcie slinivky brušnej

pankreas - vnútorne sekretorická funkcie = endokrinný (produkcia hormónov-inzulín, glukagón)
- Zvonka sekretorická funkcie = exokrinní (enzýmy - amylase, lipáza, proteolytické enzýmy - trypsín, elastáza)

Vyšetrovanie tenkého čreva

Vyšetrovanie tenkého čreva
Jedná sa predovšetkým o funkčné testy na posúdenie vstrebávanie tukov, cukrov, stopových prvkov a vitamínov. Najintenzívnejšia vstrebávanie prebieha v horných partiách tenkého čreva. Pri zápalu črevnej sliznice dochádza k poruche vstrebávania, čo sa označuje ako malabsopční syndróm.

Xylózový test - jeden z testov na preukaz poruchy resorpcie cukrov. Xylóza je pentóza, monosacharid a nie je súčasťou normálnej stravy. Xylóza sa pacientovi podá ústami a zisťuje sa jej koncentrácia v krvi av moči.
Krv sa odoberá v hodinových intervaloch a moč sa zbiera po dobu 5 hodín.
Laktózový test - laktóza je disacharid, rozpadá sa na galaktózu a glukózu a po podaní laktózy sledujeme v krvi koncentráciu glukózy.
Test s vitamínom A - používa sa na rozpoznanie poruchy vstrebávanie tukov. Vitamín A je rozpustný v tukoch. Pacientovi sa podá vit. A so stravou obsahujúce tuky. V krvi sa sleduje rastúca koncentrácia vit. A.

V súčasnej dobe

V súčasnej dobe
V súčasnej dobe sa stolica vyšetruje predovšetkým na preukaz tzv.okultního (skrytého) krvácania. Zy fyz.okolností sa denne do stolice vylúči menej ako 2,5 ml krvi / deň. Tieto straty neregistrujeme voľným okom. Jedná sa o minimálne straty, ktoré človeka neohrozujú. Voľným okom sme schopní zaregistrovať straty vyššie ako 50ml/den, pri ktorých pacient anémizuje. K animizaci však dochádza aj pri stratách krvi medzi 2,5-50ml za deň, ktoré tiež okom nevidíme (okultné krvácanie). Okultné krvácanie môže byť prvým prejavom závažného zhubného ochorenia hrubého čreva-kolorektálního karcinómu. pri včasnom odhalení tohto nádoru je možná chirurgická liečba s následným ožarovaním a chemoterapiou. v skorých štádiách tohto nádoru býva liečba veľmi účinná.

Preukaz okultního krvácanie
1) stanovenie hemu - využíva sa tzv.pseudoperoxidázové aktivity hemu (hem má podobné vlastnosti ako enzým peroxidáza - POD). Rozkladá H2O2 a uvoľnenie kyslík oxiduje bezfarebný Chromogén za vzniku farebné látky o-toluidín → toluidínová modrá

Vyšetrenie stolice

Vyšetrenie stolice
-100 - 250ml/den, obsahuje nestrávené zvyšky potravy, žlčové farbivá, črevné a pankreatickej sekrét.
- Odchýlky vo farbe: acholická stolica - neobsahuje žluč.barviva, je popolavý šedá a toto sfarbenie vzniká pri uzáveru žlč. ciest.
jasne červené ostrovčeky na povrchu stolice - znamenajú prítomnosť čerstvej krvi z konečných partií hrubého čreva, najčastejšie z hemoroidov.
čierna, dehtovitá zapáchajúca stolica = meléna - obsahuje už tráviacu krv z horných partií GIT, najčastejšie z vredov žalúdka.
- Tmavé sfarbenie stolice spôsobujú aj čučoriedky, špenát, atď
okrovo žltá stolica - spôsobená mliečnou stravou

Pred vykonaním testu

Pred vykonaním testu
Pred vykonaním testu musí pacient 3dny držať diétu s vylúčenie mäsa, výrobkov zo zvieracej krvi as vylúčením zeleniny. Test sa vykonáva 3 dni. najčastejšie používanými súpravami na zisťovanie okultního krvácanie z hemu sú hamoceult, hemofuc

Pozitívny výsledok tohto stanovenie môže byť spôsobený aj krvácaním z nosa alebo ďasien, užívaním protisrážlivých liekov, stanovením pred alebo po menštruácii alebo stanovením po vytržení zubu.
2) stanovenie globini - stanovenie imunochemickou, pomocou spec.protilátky, pacient nemosem držať diétu, pretože sa pomocou protilátky určuje krvácanie druhovej teda ľudské.

Z ostatných vyšetrení sa v stolici častejšie preukazuje ešte pankreatickej enzým elastáza (najčastejšie pri chronických zápaloch podžalúdkovej žľazy)

ALT - alaninaminotransferáza

ALT - alaninaminotransferáza
Normálne hodnoty: do 0,67 μkat / l
Katalyzuje reakcie, pri ktorých dochádza k prenosu amino skupiny z AMK na ketokyseliny a naopak. Vyskytuje sa v cytoplazme pečeňových buniek a katalyzuje:

Alanín + kyselina α - ketoglutarová kyselina pyrohroznová + kyselina glutámová

Kyselina pyrohroznová + NADH + H + kyselina mliečna (laktát) + NAD +

Stanovenie je sprevádzané úbytkom absorbancie pri 340 nm.

Aktivita stúpa pri ochorení pečene a žlčových ciest. Aktivita AST i ALT klesá pri nedostatku vitamínu B6. Derivát vitamínu B6 pyridoxalfosfát je koenzýmom aminotransferáz. Predávkovanie napr. B - komplexom naopak zvyšuje aktivitu AST a ALT.
Z hodnôt AST a ALT sa počíta tzv de Rittisův koeficient, čo je - za fyziologických pomerov je rovný 1,0 - 1,3.
Ak je pomer vyšší ako 1,3 znamená to ťažké poškodenie pečene (cirhóza, nádor), ochorenia priečne pruhovaných svalov alebo ochorenia myokardu. Hodnoty nižšie ako jedna svedčí pre ľahké ochorenie pečene.

Transferázy

Transferázy
AST - aspartátaminotransferáza

Normálne hodnoty: do 0,67 μkat / l
Vyskytuje sa v pečeňových bunkách, bunkách kostrových svalov, myokardu, obličiek av erytrocytoch.
Má dva izoenzýmami:
- Cytoplazmatický (65%)
- Mitochondriálnej (35%)
V praxi tieto 2 enzýmy neodlišuje a nestanovuje.

Kyselina asparágová + α - ketoglutarová kyselina oxaloctová + kyselina glutámová

Kyselina oxaloctová + NADH + H + kyselina Malonová + NAD +

Stanovenie je sprevádzané úbytkom absorbancie pri 340 nm.
Aktivita AST stúpa v krvi u závažných ochoreniach pečene, kostrových svalov a myokardu.

GMT - gamaglutamyltransferáza

GMT - gamaglutamyltransferáza
Normálne hodnoty:
Ženy do 1,1 μkat / l
Muži do 1,77 μkat / l

Význam GMT nie je úplne jasný, pravdepodobne opravuje poškodenú pečeňové tkanivo prenosom gama - glutamylového zvyšku na vhodný akceptory.
Vyskytuje sa v pečeni, bunkách žlčovodov, bunkách obličiek. Enzým je prevažne viazaný na membránu mikrozomů, zvyšok je rozpustený v cytoplazme.
Aktivita GMT v krvi sa zvyšuje u toxického poškodenia pečene (napr. alkoholom), zhubných nádorov pečene, u uzáveru žlčových ciest.
Spolu s ALP patrí do skupiny tzv cholestatických enzýmov.

CK – kreatinkináza

CK – kreatinkináza
Enzym, který katalyzuje vratnou fosforylaci kreatinu.

Kreatinfosfát + ADP kreatin + ATP

Vyskytuje se v kosterním a srdečním svalu a v mozkové tkáni.
Její aktivita v krvi stoupá u onemocnění kosterních svalů, po fyzické námaze, při infarktu myokardu, u iktu (mrtvice mozkové)
Normální hodnoty:
Ženy do 2,4 µkat/l
Muži do 3,2 µkat/l

Má 3 izoenzymy:
- CK – MB srdeční do 6% z celkové aktivity CK
- CK – BB mozkový
- CK – MM svalový

Hormóny HYPOTHALAMU A ADENOHYPOFÝZY

Hormóny HYPOTHALAMU A ADENOHYPOFÝZY
Hormóny HYPOTHALAMU
V blízkosti nervových jadier hypothalamu sa tvoria peptidické hormóny - statíny a liberiny (napr. somatostatin a somatoliberin-somatostatin v adenohypofýze potlačia tvorbu THP a somatoliberin ju zvýši). V inej časti hypothalamu sa tvoria hormóny oxytocín a ADH. Tieto dva hormóny sa pozdĺž nervových vlákien dostávajú do neurohypofýzy, kde sú uskladnené av prípade potreby uvoľnia do krvi. Oxytocin uvoľňuje maternicovej stahy pri pôrode a pôsobí na tvorbu materského mlieka. ADH sa uplatňuje v regulácii metabolizmu Na, vody a osmolalitu a je uvoľňuje z neurohypofýzy ako odpoveď na stratu hypoosmolární tekutiny z organizmu. Nedostatočná produkcia ADH sa označuje ako žíznivka (diabetes insipidus) a je spôsobená najčastejšie karcinómom v oblasti hypotalamu alebo neurohypofýzy. Prejavuje sa veľkými stratami tekutín močom (20 l / deň) a následnou dehydratáciou pacienta. Syntetické podoba ADH sa používa pri adiuretinovém testu (koncentračné pokus).

Hormóny ADENOHYPOFÝZY

Hormóny ADENOHYPOFÝZY
Glandotropní hormóny:
ACTH - adrenokortikotropní hormón - pôsobí na kôru nadobličiek (najviac na strednú vrstvu) - hlavne na produkciu glukokortikoidov (kortizolu)

TSH - thyreoideumstimulující hormón - produkcia hormónov štítnej žľazy

THP - somatotropní hormón (rastový) hormón - rast kostí a svalov

FSH - folikuly stimulujúci hormón - folikuly vaječníkov, semenníkov

PRL - prolaktín - pôsobí na mliečnu žľazu

LH, ICSH - luteinizační a intersticiálnej bunky stimulujúci hormón

MSH - melanocyty stimulujúci hormón

VNÚTORNÉ PROSTREDIE A TELESNÚ VODA

VNÚTORNÉ PROSTREDIE A TELESNÚ VODA
CTH - celková telesná hmotnosť
CTV - celková telesná voda
ICT - intracelulárnu tekutina (nitrobuněčná)
ECT - extracelulárneho tekutina (mimobunková)
IST - intersticiálna tekutina (v mezibuněčných priestoroch)
IVT - intravaskulárne, intravazální tekutina,
transcelulární tekutina - tekutina 3. priestoru

Živý organizmus je otvorený systém komunikujúcu s vonkajším prostredím. Medzi vnútorným a vonkajším prostredím dochádza k neustálemu obojstrannému transportu vody, živín, minerálov, kyslíka, CO2 atď
Základom vnútorného prostredia organizmu je voda v nej rozpustené látky. Je to prostredie, v ktorom prebiehajú základné biochemické deje potrebné pre život. Pre fungovanie organizmu je dôležitá stálosť vnútorného prostredia = homeostázu. Homeostázu je v každej sekunde života porušované zmíněnými biochemickými deji a zároveň opäť neobnovovali regulačnými mechanizmami. To platí v prípade, že je človek zdravý. Počas choroby dochádza k poruche regulačných mechanizmov a tým ik poruche vnútorného prostredia.

Glandotropní hormóny

Glandotropní hormóny
Glandotropní hormóny pôsobia buď na periférne endokrinné žľazu a vyvolávajú v nej tvorbu hormónov (TSH - štítna žľaza) alebo pôsobia priamo na cieľovú tkanivo (MSH - pôsobí priamo na melanocyty a ovplyvňuje pigmentáciu pokožky, prolaktín pôsobí priamo na bunky mliečnej žľazy a MES na bunky kostí a svalov)

THP
Jeho nedostatočná produkcia v detstve sa označuje ako nanismus - dieťa má zvyčajne normálne pôrodná hmotnosť ale porucha sa začne prejavovať medzi 2. - 4. rokom veku. Konečný vzrásť v dospelosti je 120 - 150 cm. Porucha sa dá liečiť dlhodobým podávaním rastového hormónu a je veľmi drahá. Príčinou býva najčastejšie nádor adenohypofýzy - operačný liečba.
Nadmerná produkcia STH v detstve spôsobí gigantismus - obří vzrůst - vyšší ako 195 cm. Príčinou je nádor adenohypofýzy.
Nadmerná produkcia STH v dospelosti spôsobuje tzv akromegálie, keď rastú len koncové (akrální, periférna) časti tela (brada, nos, uši, prsty na rukách aj nohách, nadočnicové oblúky, jazyk). Kosti rastú len do šírky (napr. obratlová tela - deformácie chrbtice - skolióza). Príčinou býva nádor adenohypofýzy - pri jeho rýchlom raste dochádza ik poruchám zraku.

CTV

CTV
CTV tvoria približne 60% CTH. Táto hodnota sa líši podľa veku, pohlavia a telesnej konštitúcia. U novorodencov tvoria CTV až 80% CTH. V starobe je naopak nižšia než obvyklý priemer. Za jeden až dva roky života klesne hodnota CTV z 80% na 60%.
Ženy so zreteľom na viac tukového tkaniva majú zvyčajne menej CTV ako muži. Štíhlí jedince majú viac CTV ako jedinci obézna alebo s nadváhou.
CTV sa delí na vodu uloženú v bunkách ICT a vodu uloženú mimo bunky ECT. ECT sa ďalej delí ešte na tekutinu uloženú v mezibuněčných priestoroch IST a tekutinu v cievach IVT.
Samostatnú skupinu tvoria transcelulární tekutiny (nejdou ztařadit do žiadnej z predchádzajúcich skupín. Patrí sem mozkomíšní mok, tekutiny GIT, tekutiny v kĺbových puzdrách atď
Objem telesných tekutín závisí tiež na príjme a výdaji tekutín. V ideálnom prípade je príjem aj výdaj rovnaký a potom hovoríme o vyrovnanej bilancii tekutín. Ak je príjem vyšší ako výdaj, hovoríme o pozitívnej bilancii - objem tekutín v tele sa zvyšuje a môžu vzniknúť opuchy. Ak sú straty tekutín vyšší ako ich príjem hovoríme o negatívnu bilanciu a hrozí dehydratácia. U zdravého človeka si telo riadi prísun a výdaj tekutín pomocou regulačných mechanizmov (pocit smädu, receptory vo veľkých cievach, činnosť obličiek).

Zloženie ICT:

Zloženie ICT:
- Hlavným katiónom ICT je K +
- Hlavným anion sú fosfáty
Zloženie ICT sa líšia podľa typu tkaniva. Rozdiely koncentrácií iónov medzi ICT a ECT sú udržiavané:
1. Donnanovou rovnováhou
2. systémom "iónových púmp"

Donnanova rovnováha - intra a extracelulárnej priestor sú od seba oddelené polopriepustnú membránou, ktorá je priepustná iba pre niektoré častice napr. pre Cl-z ECT. Nepriehľadná je pre väčšinu bielkovín s ICT. Medzi týmito tekutinami sa po určitom čase vytvorí rovnovážny stav = Donnanova rovnováha.
Prienik iónov cez semipermeabilní membránu sa deje formou jednoduchej difúzie.

Iónové pumpy sú enzýmovej systémy, ktoré sú súčasťou bunkových membrán. Čerpají ióny proti koncentračnímu gradientu. Energiu získavajú štiepením ATP.
Př. Na + - K + - ATP - aza (sodíkodraslíková adenosintrifosfatáza).
Stálosť vnútorného prostredia je zabezpečená stálym zložením iónov (pH) = izohydrie.
Stálosť koncentrácie osmotický aktívnych častíc = izoosmie.

Regulácia objemu tekutín

Regulácia objemu tekutín
Regulácia objemu tekutín, koncentrácia minerálov a koncentrácia osmotický aktívnych látok sú prepojené mechanizmy, ktoré zabezpečujú homeostázu.
Príjem tekutín môže tvoriť voda v nápojoch a potrave, voda v náhradných roztokoch, metabolická voda (vzniká pri biochemických dějích), dýchanie zvlhčeného vzduchu pri nebulizaci.
Výdaj tekutín sa deje močom, tekutinami a sekréty tráviaceho traktu, dýchaním, potením, odparovaním z pokožky najmä pri zvýšenej teplote alebo krvácaním z rán.
Jednotlivé telesné tekutiny majú rôzne zloženie, líšia sa v koncentrácii minerálov, bielkovín, hodnote pH atď
V laboratóriu zvyčajne vyšetrujeme ECT, tekutinu IVT (= sérum alebo plazma)
Zloženie ECT:
- Hlavným katiónom ECT je Na, ďalej sú významne zastúpené K, Ca, Mg.
- Hlavným anión ECT je Chloridový aniónov Cl-, HCO3-, bielkoviny a skupina tzv reziduálnych anion RA (= reziduálne), kam patrí napríklad fosfáty, sulfáty, ketokyseliny, laktát apod
- Za fyziologických okolností je stĺpec anion a katiónov rovnako vysoký, aby bola zachovaná elektroneutralita. Počas choroby dochádza k zmenám iónového zloženie telesných tekutín ak poruche vnútorného prostredia organizmu.

Názvoslovie ENZÝMY

Názvoslovie ENZÝMY
1. triviálne - ptyalin (slinné amyláza)
2. odvodené od substrátu - laktáza, sacharáza, amyláza, lipáza
3. odvodené od účinku - kreatínkinázy, aspartátaminotransferáza, laktátu
4. medzinárodné - enzým sa radí do skupiny, podskupiny, triedy a má ešte poradové číslo v danné triede.
Skupiny:
- Oxidoreduktázy
- Transferázy
- Hydrolázy
- Lyázy
- Izomerázy
- Lipázy

ENZÝMY PODĽA PÔVODU

1. SEKREČNÍ
2. BUNEČNÉ

VŠEOBECNÉ ENZYMOLOGIE

VŠEOBECNÉ ENZYMOLOGIE
Jedná sa o náuku o enzýmoch. Sú to biokatalyzátory chemických reakcií v živých objektoch. Sú to látky bielkovinového charakteru a ich molekula je tvorená dvoma časťami: apoenzymem (bielkovinová časť) koenzýmom (vitamín). Súčasťou apoenzymu je tzv aktívne centrum enzýmu. Je to polypeptidový reťazec s funkčnými skupinami, ktoré umožňujú väzbu enzýmu na substrát. Substrát je látka, na ktorú enzým pôsobí a vytvára s ňou počas reakcie prechodný komplex. . .
Mechanizmus účinku enzýmu spočíva vo vytvorení prechodného komplexu enzým-substrát, v ktorom nastane vlastné reakcie az ktorého vzniká komplex enzým-produkt. Na konci reakcie je voľný konečný výrobok a enzým, ktorý môže vstúpiť do ďalšieho chemického deje.

Sekreční enzýmy

Sekreční enzýmy
- Enzýmy preukazujeme zvyčajne v krvi. Sú tvorené bunkami niektorých tkanív a orgánov a vylučované buď do krvi alebo do oblasti GIT. Príkladom enzýmu vylúčených do krvi je esterázy (CHE, CHS) - je známkou schopnosti pečene syntetizovať bielkoviny. Pri poruche fce pečeňové bunky sa jej tvoria menšie množstvo av krvi klesá jej aktivita.
Príkladom enzýmu vylúčených do čreva je amyláza alebo lipáza. Tvorí sa v bunkách slinivky brušnej a do čreva sa dostávajú slinivkovým vývodom a spoločným žlčovody. Ak dôjde k poruche tkanivá pankreasu alebo uzáveru vývode, enzýmy sa do čreva nedostanú. Ich aktivita v krvi stúpa.

Bunkové enzýmy - pôsobí v bunke, v ktorej vznikajú. Pri poškodení bunky sa enzým vyplaví do krvi a tam stúpa jeho aktivita. Príkladom je AST, ALT, LD, CK

Množstvo enzýmu sa vyjadruje:
- V aktivite enzýmu
- V hmotnostnej koncentrácii

Laboratórne sa najčastejšie stanovujú izoenzýmami CK:

Laboratórne sa najčastejšie stanovujú izoenzýmami CK:
- CK-MB (z myokardu)
- CK-BB (z mozgu)
- CK-MM (z kostrových svalov)
M.. . svalová podjednotka
B.. . mozgová podjednotka
CK-MB sa zvyšuje u akútneho IM, u zápalu srdcového svalu a ďalších ochorení srdca
CK-BB sa zvyšuje u mozgovej mŕtvice au zápalov centrálneho nervstva
CK-MM sa zvyšuje zápalov a poškodenie kostrových svalov

Ďalej sa stanovujú izoenzýmami LD, ktoré vznikajú kombináciou 4 podjednotiek
H. . . srdcový
M. . . svalovej
LD1, LD2, LD3, LD4, LD5

LD1 - hhhh
LD2 - HHHM
LD3 - HHMM
LD4 - HMMM

Aktivita enzýmu

Aktivita enzýmu
Aktivita enzýmu sa vyjadruje v katal, mikrokatalech, nanokatalech (alebo IU - medzinárodné jednotky)
1 katal vyjadruje aktivitu enzýmu, ktorý premení 1 mol substrátu za časovú jednotku a za presne definovaných podmienok
1 μkat / l = 60 IU / l
1 IU / l = 16,7 nkat / l

Hmotnostná koncentrácia sa vyjadruje vg / l alebo mg / l
"Mass concentration" - označenie hmotnostnej koncentrácie CK - MB - mass (izoenzym CK)
Izoenzýmami
Sú to enzýmy katalýzy rovnaký typ reakcie, ale prítomné v rôznych tkanivách a orgánoch. Zvyčajne sa mierne líšia v bielkovinové časti svojej molekuly. Sú to rôzne molekulárne formy jedného enzýmu a majú rovnakú substrátové špecifickosť ale odlišné fyzikálne a chemické vlastnosti. Toho sa využíva pri ich stanovení (rôzne pohyblivosť pri ELFO, odlišná termostabilita).

LD5 - Mmmm - hepatálnou

LD5 - Mmmm - hepatálnou
LD5 - Mmmm - hepatálnou - zvýšený u ochorenia pečene

LD1, LD2 - srdcové - zvýšené u ochorenia srdca, označujú sa ako HBD - hydroxybutyrátdehydrgenáza

MAKROENZYMY
Vznikajú väzbou enzýmov napr. na imunoglobulín alebo na inú transportnú bielkovinu krvi. Vznikne tak veľký molekulárnej komplex, ktorý sa nedostane do moču. Najčastejším novovznikajúcom makroenzymem je makroamyláza. Prejaví sa nálezom zvýšenej aktivity amylázy v krvi a nulovej aktivity v moči. Pacient môže byť nesprávne liečený ako človek s chorým pankreasu a touto liečbou môže byť aj poškodený. Príčina vzniku makroamylazémie nie je úplne objasnená. Býva častejšie u ľudí s autoimunitným chorobami, zhubnými nádormi.

STANOVENIE ENZÝMY

STANOVENIE ENZÝMY
Spektrofotometrické stanovenie:
- Prerušovane, endpoint = v koncovom bode - absorbancia sa meria na začiatku a na konci reakcie. Nevýhodou je možnosť chyby pri nelineárnym priebehu reakcie
- Kontinuálne, kinetickou - z merania sa vyberie nejlineárnější oblasť.
Pri fotometrické stanovenie sa využíva optického testu, ktorý je založený na zmenách elektrónové konfigurácie jadra NADH redukované na oxidované formu NAD + a meranie prebieha v UV oblasti pri 340 nm

Imunochemickou stanovenie:
Používa sa na stanovenie hmotnostnej koncentrácie u izoenzýmami CK-MB mass (g / l)

PRIEBEH REAKCiE ENZYME - Substrat

PRIEBEH REAKCiE ENZYME - Substrat
Reakčné podmienky:
1. TEPLOTA - stanovenie enzymatickej aktivity sa vykonáva najčastejšie pri teplote 37 ° C. reakcie prebiehajú rýchlo ale často nelineárne. Najviac sa však blíži pomery v tele. Predtým sa často užívala teplota 25 ° C - reakcie boli lineárne ale pomalé. Teplota 37 ° = teplotné optimum pre väčšinu enzýmov
2. pH substrátu - pH pri ktorom je aktivita najväčší sa označuje ako pH optimum. Pre väčšinu je to pH okolo 7,4 (pH krvi) ale sú aj enzýmy, ktoré potrebujú kyslé pH - pepsín a aj enzýmy, ktoré potrebujú pH alkalickej - ALP
3. KONCENTRÁCIE substrátu udáva ju Michaelisova konštanta. Vyjadruje koncentráciu substrátu, pri ktorej je rýchlosť reakcie rovná polovici max rýchlosti.
4. PRÍTOMNOSŤ Aktivátor a inhibítory - aktivátory sú látky, ktoré urýchľujú priebeh reakcie - katión ľahkých kovov. Inhibítory brzdia priebeh reakcie - lieky a katiónov ťažkých kovov.

Senzitivita

Senzitivita
Senzitivita =
Diagnostická senzitivita je teda ukazovateľom spoľahlivosti metódy odhaliť chorobu. Udáva pravdepodobnosť, že výsledok bude pozitívny, ak je vyšetrované osoba choré. Diagnosticky najcennejšie testy majú čo najvyššiu senzitivitu.

Diagnostická Špecifickosť (špecifickosť) - je definovaná ako podiel zdravých osôb s negatívnym testom z celkového počtu testovaných zdravých jedincov
Specifika =
Diagnostická Špecifickosť je teda meradlom spoľahlivosti metódy vylúčiť prítomnosť choroby. Vyjadruje pravdepodobnosť negatívneho výsledku u zdravej osoby.

Vzťah medzi diagnostickú senzitivitu a špecifickosť - senzitivita sa týka populácie chorých, zatiaľ čo dg. Špecifickosť má vzťah k zdravým osobám. V ideálnom prípade umožňuje laboratórne metóda úplne od seba oddeliť chorých a zdravé (tzn. dg. Špecifickosť a senzitivita = 100%)
Tento prípad v praxi neexistuje. U väčšiny metód sa výsledky zdravých a chorých do určitej miery prekrývajú
Jedná sa o kompromis, keď metóda má približne rovnakú špecifickosť aj citlivosť a teda aj približne rovnaký počet FP a FN výsledkov.

DIAGNOSTICKÉ VLASTNOSTI LABORATÓRNE METÓDY

DIAGNOSTICKÉ VLASTNOSTI LABORATÓRNE METÓDY
Vyšetrovanej osoby môžu z hľadiska prítomnosti určitej choroby patriť k jednej z dvoch populácií (chorým alebo zdravým). Laboratórny test má za úlohu tieto dve skupiny od seba oddeliť. V ideálnom prípade dáva test pozitívny (chorobný) výsledok u všetkých chorých a všetci zdravia majú výsledok testu negatívne (fyziologický). V praxi to tak nie je. Väčšina testov dáva + výsledok iu malej časti zdravých osôb, zatiaľ čo určitý podiel chorých má výsledok testu neg. Z tohto hľadiska sa vyšetrovanie jedince rozpadajú na 4 skupiny:
- Chorí s + testom (správne pozitívne SP)
- Chorí s neg testom (falošne negatívne FN)
- Zdravia s neg testom (správne negatívne SN)
- Zdravia s + testom (falošne pozitívne FP)

Diagnostická citlivosť (senzitivita) - je definovaná ako podiel chorých s pozitívnym testom k celkovému počtu testovaných osôb 0 - 100%

Hormóny štítnej žľazy a prištítnych teliesok

Hormóny štítnej žľazy a prištítnych teliesok
Štítna žľaza = glandula tyreoidea
Je uložená tesne pod hrtanu, pod štítnou chrupavkou, po oboch stranách priedušnice. Má tvar písmena H a je tvorená 2 laloky veľkosti slivky alebo holubího vajcia. Tieto dva laloky sú spojené stredným lalokom (= ismus). Hmotnosť štítnej žľazy je 18 - 40g a dĺžka 5 - 8 cm. Je to najväčší endokrinný žľaza v tele. Za fyziologických okolností nie je hmatná. Pri patologickom zväčšenie dosahuje až veľkosti päste a môže mať rôzne tvary. Má tuhú konzistenciu a je krytá väzivové blany. Vo väziva štítnej žľazy sú folikuly, ktoré sú tvorené 1 vrstevným kubickým epitelu, ktorý ohraničuje dutinku vyplnenú koloidy. Koloidy obsahuje zásobu syntetizovaných hormónov. Pri náhlom nedostatku I vydrží táto zásoba až na dva mesiace. Vedľa folikulárna buniek sú bunky parafolikulární produkujúce kalcitonín. Kalcitonín ovplyvňuje metabolizmus Ca tým, že podporuje jeho ukladanie do kostí.

Pre pomer diagnostické citlivosti

Pre pomer diagnostické citlivosti
Pre pomer diagnostickej citlivosti a špecifickosti je rozhodujúci tzv cut-off hodnota (diskriminačné hodnota alebo časť). Ide o hodnotu, ktoré bude výsledok testu považuje za pozitívny. Je to zmluvná hodnota, ktorá sa mení podľa účelu testu. Napr. u metód používaných na sreeningovým účely volíme cut-off hodnotu tak, aby metóda bola 100% citlivá. Nesmie uniknúť ani jediný chorý a metóda nesmie dať FN výsledok. Takto postavená má viac FP výsledkov a zdravej osoby s FP výsledkom sú potom vylúčené v ďalšom kole vyšetrovania použitím iných testov.

Účinky hormónov štítnej žľazy:

Účinky hormónov štítnej žľazy:
Podporujú odbúravanie cholesterolu, podporujú proteosyntézu a zvyšujú tvorbu glykogénu.
Zrýchľujú metabolizmus, zvyšujú srdcovú frekvenciu.
Ovplyvňujú psychiku (nadprodukcia vedie k hyperaktivitě a podráždenosti.
Nedostatok hormónov vedie k oneskoreniu kostného rastu a spomalenie psychickej vývoja.

Zväčšenie štítnej žľazy je struma (vole) - môže byť sprevádzané nadprodukciou ale aj ich nedostatočnou tvorbou alebo môže byť tvorba úplne fyziologická.
Pri hyperthyreóze má pacient zrýchlený metabolizmus, je mu pořád horko, chudne, má zrýchlenou srdcovou a tepovú frekvenciu, zvýšený krvný tlak a tzv exoftalmus (očný bulby sú vytlačené z očnice v dôsledku ukladania proteínových a uhľovodíkových hmôt.
Tieto prejavy sa označujú ako Gravesova - Basedowova choroba.

Syntéza hormónov štítnej žľazy:

Syntéza hormónov štítnej žľazy:
Folikulárna bunky vychytávajú z krvi jodidy, ktoré sú zoxidovať H2O2 za prítomnosti peroxidázy na jód. Ten sa nadviaže na AMK tyrozín a vzniká monojodtyrosin a dijodtyrosin (MIT a DIT). Spojením MIT a DIT vzniká trijodtyronin (T3) a spojením dvoch molekúl DIT vzniká tetrajodtyronin (T4).
Vytvorené hormóny sú viazané na bielkovinu o vysokej molekulárnej hmotnosti = thyreoglobulin. V tejto väzbe sú uchovávané vo folikulom. Uvoľňovanie T3 a T4 je riadené hypotalamohypofyzárním systémom, najmä vplyvom TSH - jedná sa o princíp spätnej väzby.

Po rozštiepeniu s thyreoglobulinem sa hormóny štítnej žľazy uvoľňujú do krvi. Tu sa vyskytujú ako voľné alebo vo väzbe na plazmatické bielkoviny:
- TBP (tyroxín binding protein)
- Albumín
- Prealbumin
Fyziologicky účinná je iba voľná frakcia hormónu.

Hypothyreózu

Hypothyreózu
Hypothyreózu sa prejavuje spomalením látkovej výmeny, pacient priberá, je pomalá, spava, unavený, má vysokú hladinu cholesterolu, je mu zima v podkožného tkaniva je pastózní opuch - myxedém.
Hypothyreózu môže byť aj vrodená alebo môže byť spojená s nedostatočným prísunom jódu do organizmu. Má za následok závažnú poruchu telesného i duševného vývoja dieťaťa (kretenismus).
Z týchto dôvodov sa v súčasnosti vykonáva sreening novorodencov, ktorým sa vyhľadávajú prípadné poruchy tvorby thyreoideálních hormónov.

Prištítne telieska = glandula parathyreoidea
Sú 4 (2 páry).
Sú zanorenie vzadu do tkaniva štítnej žľazy. Produkujú parathormón - ovplyvňuje metabolizmus kalcia tým, že zvyšuje jeho uvoľňovanie z kostí a znižuje vstrebávanie fosforu.

Hypoparathyreóza = nedostatočná tvorba Parathormón

Hypoparathyreóza = nedostatočná tvorba Parathormón
Hypoparathyreóza = nedostatočná tvorba Parathormón. Príčinou býva zničenie prištítnych teliesok karcinómom, úrazom alebo zápalom alebo ich nešetrné odstránenie pri operácii štítnej žľazy. Môžu byť zničené aj pri ožarovaní iného zhubného nádoru.
Laboratórnym prejavom je hypokalcémia (zníženie celkového aj ionizovaného Ca).
Klinickým prejavom sú predovšetkým kŕče.

LABORATÓRNE VYŠETROVANÍ v tehotenstve, detstve a VO VEKU

Špecifické etapy v živote človeka, charakterizované určitými rozdielmi v biochemických výsledkoch.

OSOBITOSTI laboratórneho VYŠETROVANÍ V Tehotenstvo

Počas tehotenstva je potrebné značné adaptácie materského metabolizmu na zabezpečenie potrieb plodu (z vajíčka vzniká plod, ktorý má v priemere 3,5 kg a meria 50 cm, vzniká 800 ml plodovej vody, placenta narastá do 650 gramov a maternica zo 40 g na 1, 2 kg).
Pre správny vývoj gravidity je potrebná produkcie estrogénov a gestagénnymi najskôr žltým těhotenským rotora a potom placentou, ktorá produkuje HPL, ktorý má podobný účinok ako rastový hormón. Podporuje proteosyntézu a pripravuje mliečnu žľazu na tvorbu mlieka.

Hyperparathyreóza = nadvýrobou Parathormón. Môže byť:

Hyperparathyreóza = nadvýrobou Parathormón. Môže byť:
- Primárny
- Sekundárne
- Terciárnou
primárne je spôsobená najčastejšie karcinómom v oblasti prištítnych teliesok.
Sekundárne a terciárne súvisí so zlyhaním obličiek, kedy sa netvoria kalcitriol.
Terciárnou hyperparathyreóza vzniká zo zanedbané a nevhodne liečenej sekundárne hyperparathyreózy, kedy pacientovi nebol včas dodaný kalcitriol. Na jeho dodatočné neskoré dodanie už prištítne telieska nereagujú. V súčasnosti by sa nemali vyskytnúť.
Hypeparathyreóza sa laboratórne prejaví hyperkalcémií (stúpa ionizovaný aj celkový vápnik v krvi).
Klinicky sa prejaví zvýšenou únavnosť a spavosť, tráviacimi ťažkosťami (zápchou) a zvýšenou tvorbou močových kameňov s obsahom vápnika.

HCG

HCG
HCG - sa využíva k skorej diagnostike tehotenstva, k rozpoznaniu paralelné a mimoděložního tehotenstva, resp. k rozpoznaniu nádorov súvisiacich s placentou. Stanovenie HCG sa vykonáva v moči alebo v sére.
Pri prvej návšteve u gynekológa - pôrodník je potrebné vykonať základné vyšetrenie moču a krvi s dôrazom na zistenie choroby obličiek, pečene, štítnej žľazy, cukrovky, vysokého tlaku, atď u matky. Dôležitá je aj anamnéza (předchorobí) s dotazom na výskyt dedičných chorôb v blízkom príbuzenstva. Počas gravidity dochádza k zväčšeniu objemu CTV v materinskom organizmu. Najviac sa zväčšuje objem ECT. Objem krvi sa zvýši asi o 1500 ml. Nárast počtu ery nie je tak výrazný a preto výsledkom týchto zmien je hemodiluce (riedenie krvi). V dôsledku hemodiluce klesá osmolalita, koncentrácia plazmatických bielkovín hlavne albumínu a vyvíja sa anémia, stúpa srdcová frekvencia a zvyšuje sa prietok krvi placentou, maternicou ale aj obličkami - z tohto dôvodu sa zvyšuje glomerulárnej filtrácie av krvi klesá koncentrácia močoviny a kreatinínu. Dochádza tiež k vyšším stratám bielkovín a glukózy do moču. zároveň je intenzívnejší proteosyntéza (vďaka hemodiluci to nemusí byť príliš vyjadrovať) a zvyšuje sa tvorba predovšetkým transportných bielkovín (transferin, ceruloplasmin, albumín, TBP ...)

Počas tehotenstva

Počas tehotenstva
Počas gravidity je ovplyvnený aj metabolizmus glukózy - v prvej polovici je sklon skôr k hypoglykémiím v dôsledku zvýšenej tvorby inzulínu. V druhej polovici sú periférne tkanivá rezistentnější na účinky inzulínu a nachádzame skôr vyššie hodnoty glykémie. Mení sa aj metabolizmus lipidov - stúpa koncentrácia celkového cholesterolu a triglyceridov.
Aktivita enzýmov je v tehotenstve mierne znížená (GMT, AST, ALT atd ...) s niektorými výnimkami (aktivita ALP progresívne rastie až do pôrodu a potom prudko klesá. Aktivita CK popr. LD v krvi matky stúpa počas pôrodu. Potom dochádza opäť k prudkému poklesu .
Koncentrácia stopových prvkov v krvi matky vplyvom hemodiluce obvykle klesá.

U tehotných žien sa robí sreening vrodených vývojových chýb plodu. Zvyčajne je to v 16. týždni tehotenstva. Hľadajú sa rozštěpové vady CNS (chrbtice a chrbticového kanála), pre ktoré svedčí nález zvýšenej koncentrácie α fetoproteinu v sére matky. Zistením sa overí v plodovej vode, kdebývá naviac zvýšená aktivita CHS.

OSOBITOSTI laboratórneho VYŠETROVANÍ U DETÍ

OSOBITOSTI laboratórneho VYŠETROVANÍ U DETÍ
Obtiažny odber krvi. U novorodencov sa krvi najčastejšie odoberá z päty (nikdy nie zozadu, kde je patní kost - odoberá sa z boku). Je to zmes krvi z kapilár, drobných artérií a žiliek.
U väčších detí sa krv odoberá z prsta alebo z akejkoľvek viditeľné žily.
Krvinky novorodencov sú krehko a ľahšie podliehajú hemolýzu. Objem CTV dieťaťa tvorí až 80% jeho hmotnosti. Obsah tuku v tele novorodenca je výrazne nižšie vo vzťahu k CTH ako u dospelých.
V pečeni sú malé zásoby glykogénu a novorodenci majú výrazný sklon k hypoglykémiím.
V krvi je nízka hladina Ig, placentou prechádza z krvi matky len Ig G. Vlastná tvorba Ig začína približne od pol roka veku dieťaťa.
Novorodenci najmä nedonosených majú nezrelé niektoré enzýmovej a transportné systémy dochádza u nich napríklad k poruche vychytávania bilirubínu z krvi ak jeho nedokonalé konjugáciu v hepatálnou tkanive. To je jedna z príčin fyziologického oktetu.
Deti majú nižšie koncentrácie krvných lipidov, močoviny, kreatinínu, kyseliny močovej, pohlavných hormónov atď Oproti dospelým u nich necházíme vyššiu koncentráciu ALP, ACP a zvýšenú hodnotu anorganického fosforu (súvisí s rastom).

Dawnova choroba

Dawnova choroba
Ďalšou významnou vrodenou vývojovou chybou je trizonie (ztrojení) 21. chromozómu = Dawnova choroba. Ide o vrodenú vývojovú chybu s poruchou telesného i duševného vývoja dieťaťa s poruchou imunity. Psychicky sú postihnutí jedinci po celý život na úrovni 6 ročných detí. Častejšie mývají srdcové chyby. Výskyt stúpa u detí matiek, starších ako 40 rokov. V krvi matky nachádzame znížené hodnoty α1 fetoproteinu. Vývojová vada je potvrdená genetickým vyšetrením a vyšetrením plodovej vody.
V posledných 3 mesiacoch tehotenstva sa odhaduje stupeň zrelosti plodu, predovšetkým stupeň zrelosti pľúc a obličiek. Zrelosť pľúc sa hodnotí na základe stanovenia koncentrácie fosfolipidové lýtka = surfaktant v plodovej vode. Surfaktant vystýlá pľúcnej sklípky a umožňuje správnu funkciu pľúc pri dýchaní.
Zrelosť obličiek sa hodnotia stanovením koncentrácie kreatinínu v plodovej vode.

Tesne po pôrode

Tesne po pôrode
Tesne po pôrode sa vyšetrujú dedičné poruchy metabolizmu a hľadá sa predovšetkým vrodená hypothyreózu a porucha metabolizmu AMK - fenylketonúria.
Vrodená hypothyreózu sa vyšetruje na základe stanovenia hladiny TSH v krvi novorodenca.
Fenylketonúria je porucha premeny AMK fenylalanínu na AMK tyroxín, keď sa v krvi dieťaťa hromadia prvú z uvedených AMK a spôsobuje kŕče, poruchy psychického i telesného vývoja dieťaťa. Tieto prejavy sa objavia až po 6 mesiaci veku dieťaťa, preto je včasná diagnostika veľmi dôležitá. Fenylketonúria sa vyhľadáva pomocou tzv Gutrieho testu, ktorý je založený na raste kolónií mikroorganizmu Bacillus subtilis na živnej pôde s kvapkou krvi novorodenca. Mikróbov stúpa na živnej pôde iba vtedy, keď je v kvapke krvi zvýšená koncentrácia fenylalanínu.

OSOBITOSTI laboratórneho VYŠETROVANÍ VO VEKU

Starší ľudia mávajú väčšinou viac chorôb naraz a berú súčasne viac liekov. To môže mať vplyv na laboratórne výsledky. S narastajúcim vekom klesá hladina clearence endogénneho kreatinínu, zhoršuje sa vylučovanie nepotrebných a toxických látok obličkami - z tohto dôvodu rastie nebezpečenstvo predávkovania rôznymi liekmi.

MOZKOMÍŠNÍ MOK (LIKVOR)

MOZKOMÍŠNÍ MOK (LIKVOR)
Vyplňuje dutiny centrálneho nervstva - mozgové komory a tzv subarachnoideální priestory (sú to priestory pod jedným zo 3 obalov CNS pod tzv arachnoideou - pavoučnicí). Mozog aj chrbticu sú kryty 3 vazivovými obaly - tvrdú plenu, pavoučnicí a mäkkú plenu.
Likvor vzniká ultrafiltrácia krvnej plazmy av cievnych pletení av mozgových dutinách. Chráni mozog a miechu pred mechanickým poškodením, zabezpečuje látkovú výmenu, vyrovnáva zmeny osmolalitu, pH, koncentrácia iónov apod
Chráni CNS pred patogény.
Denne vzniká asi 600 ml likvoru a väčšina sa opäť vstrebá. V likvorových cestách je asi 150 ml likvoru.
Likvor sa najčastejšie získava tzv bedrová punkciou, čo je napichnut chrbticového kanála v bedrovej oblasti chrbtice. U malých detí, ktoré majú ešte väzivové lupienky medzi lebečními kosťami sa preniká priamo do mozgových komôr = komorová punkcia.
Vo výnimočných prípadoch sa odber likvoru vykonáva z miesta medzi tylna kostí a 1. krčným stavcom = suboccipitální punkcia.

Dochádza k poruche metabolizmu lipidov

Dochádza k poruche metabolizmu lipidov
Dochádza k poruche metabolizmu lipidov, zvyšuje sa celkový a LDL cholesterol a klesá HDL cholesterol.
V starobe sa tiež zhoršuje glukózovej tolerancie, znižuje sa náchylnosť periférnych tkanív na inzulín - častejšie sa vyvíja diabetes mellitus (2. typu).
Klesá koncentrácia plazmatických bielkovín (poruchy výživy a funkcie pečene).
Často nachádzame poruchy minerálového hospodárstva napr. hypokalémii z nedostatočného prísunu ovocia a zeleniny. Zvyšuje sa sérový osmolalita a znižuje objem CTV (vo veku stúpa prah smädu).
V starobe je aj väčšia pravdepodobnosť rozvoja nádorového ochorenia. U niektorých nádorov sa v súčasnosti vykonáva ich aktívne vyhľadávanie napr. u kolorektálního karcinómu, kde sa u všetkých ľudí starších ako 50 rokov vyšetruje stolice na okultné krvácanie.
Uvažuje sa aj o plochu stanovovaní PSA (prostatického špecifického antigénu) slúžiaceho k diagnostike karcinómu prostaty u mužov nad 50 rokov veku.
Nachádzame vyššie hodnoty CRP a sedimentácie krviniek ako nešpecifické ukazovatele zápalu alebo nádoru.
V dôsledku úbytku svaloviny klesá aktivita CK.
Dochádza k odbúravaniu kostného tkaniva a rozvoj osteoporózy.

Likvor

Likvor
Likvor je potrebné ihneď po odbere doručiť do laboratória a najdlhšie do jednej hodiny po odbere spracovať (dochádza k cytolýze, zníženie glukózy, zvýšenie laktátu). Na základné cytologického a biochemické (= cytochemické) vyšetrenie je potrebné 2 - 3 ml.
Vzhľad likvoru: za fyziologických okolností je číry, bezfarebný, bez zákalu.
Růžová až červená farba je spôsobená prímesou krvi a hovoríme o sanquinolentním likvoru. Krv pochádza z poranených ciev v likvorových cestách alebo je spôsobená krvácaním podkožných ciev v okolí vpichu = artificiální krvácanie - v tomto prípade sa robí tzv skúška 3 skúmaviek - likvor sa odoberá do 3 skúmaviek a v tretej už by mal byť číry a bezfarebný.
Žltkastý likvor = xantochromní - je spôsobený vysokou koncentráciou bielkoviny alebo rozpadlým krvným farbivom
Zelenožltý zakalenie likvor býva u hnisavých zápalov CNS.

Cytologické vyšetrenie LIKVORU

Cytologické vyšetrenie LIKVORU
Vykonáva sa do jednej hodiny p odberu po zafarbenie a najčastejšie vo Fuchs - Rosenthalově komôrke.
Typy buniek:
- Červené krvinky - hodnotí sa slovne napr. ojedinelé, početné, záplava
- Mononukleárov - lymfocyty + monocyty
- Polynukleáry - najčastejšie neutrofilní granulocytmi
- Atypické bunky - rôzny tvar, rôzne jadro a sú to najčastejšie bunky nádorov
Fyziologický nález = fyziologická oligocytóza
- U dospelých do 3 lymfocytov / 1μl
- U novorodencov do 10 lymfocytov / 1μl - nie je ešte dobudovať tzv hematolikvorová bariéra, čo je hranica medzi krvou a likvorem zložeená bazálnym membrány buniek cievnej výstelky.
Zistením vyššieho počtu buniek v likvoru sa označuje ako pleocytóza. Pleocytóza s prevahou polynukleárů býva u bakteriálnych zápalov (rádovo tisíce / 1μl) súčasne s tým býva pokles koncentrácie glukózy a vzostup koncentrácie laktátu a bielkoviny.

ZÁKLADNÉ CHEMICKÉ VYŠETRENIE LIKVORU

ZÁKLADNÉ CHEMICKÉ VYŠETRENIE LIKVORU
1.) bielkovina = proteinorachie 0,15 - 0,4 g / l
80% bielkoviny pochádza zo séra, zvyšok je tvorený vnútri likvorových ciest = intratekálne tvorba. Zvýšená hodnota bielkoviny býva u bakteriálnych zápalov CNS au autoimunitných ochorení, kedy sa zvyšuje predovšetkým intratekálne tvorba.

2.) glukóza = glykorachie 2,5 - 3,8 mmol / l
Mala by predstavovať asi 60% glykémie. Zvyšuje sa u diabetikov a znižuje sa u bakteriálnych zápalov CNS.

3.) laktát 1,2 - 2,1 mmol / l
Jeho hodnota sa zvyšuje u bakteriálnych zápalov CNS.

4.) chloridmi 120 - 132 mmol / l
Pokles chloridov býva u tuberkulózne zápalov CNS.

Pleocytóza

Pleocytóza
Pleocytóza s prevahou mononukleárov (rádovo stovky / 1μl) býva u vírusových infekcií au tuberkulózne zápalov CNS.
Súčasný nález zvýšenej hodnoty bielkoviny a zvýšeného počtu buniek (najčastejšie polynukleárů) sa označuje ako proteinocytologická asociácie a býva najčastejšie u bakteriálnych zápalov CNS.
Súčasný nález zvýšené bielkoviny a normálneho počtu buniek sa označuje ako proteinocytologická disociácie a býva u prekážok v likvorových cestách napr. u nádoru v chrbtovým kanála, keď likvor nemôže cirkulovať.

Spektrofotometria likvidēti:
- Slúži k odhadu približného veku krvácanie do likvorových ciest
- Využíva sa odlišného absorb. Maxima u rôznych derivátov hemoglobínu a bilirubínu:
- OxyHb ... 415N ... .. pred 2-4 hodinami
- Bilirubín ... 460nm .... Pred 10-12 hodinami
- Methemoglobínu ... .406 nm .... Staršie krvácanie (týždne, mesiace)

Bilirubín

Bilirubín
Bilirubín naviazaný na albumín reaguje s činidlom až po uvoľnení z tejto väzby, teda nepriamo. Hovorí sa mu preto nepriamy alebo Nekonjugované. Väzbou bilirubínu na albumín vzniká veľká molekula, ktorá neprenikne zdravým glomeruloch do moču.

Bilirubín esterifikáciou k.glukuronovou sa nazýva konjugovaný a priamy, pretože s činidlom na stanovenie bilirubínu reaguje priamo. V krvi sa vyskytuje len za patologických stavov, pretože je vo vode rozpustný, nie je viazaný na albumín a voľne preniká do moču.
Konjugovaný bilirubín sa z pečeňové bunky dostáva do pečeňových žlčovodov a žlčou potom do tenkého čreva. Tam dochádza účinkom črevných baktérií na jeho redukciu na rad ďalších farebných produktov, z ktorých najväčší podiel tvoria urobilinogen a sterkobilinogen. Tieto farbivá spôsobujú hnedé sfarbenie stolice. Časť týchto farbív je absorbované do krveních kapilár tenkého čreva a tzv portálna krvou (obehom) sa dostáva späť do pečene. Pečeňové bunky urobilinogen vychytají a ďalej metabolizujú. pri ich poškodenia sa urobilinogen dostáva do veľkého krvného obehu, dostane sa k ľadvinám a objavuje sa v moči. Časť urobilinogenu a sterkobilinogenu je v konečných partiách hrubého čreva oxidáciu vzdušným kyslíkom na urobilin a sterkobilin a majú hnedú farbu. Zvýšená koncentrácia bilirubínu v krvi je hyperbilirubinémie. Prejavuje sa žltým sfarbením kože, slizníc, očného bielka a označuje sa ako žltačka neboli ikterus.

Metabolizmus žlčových FARBÍV

Metabolizmus žlčových FARBÍV
Sú to heterocyklické zlúčeniny tvorené 4 pyrolovými jadrami, ktoré sú spojené methinovými (methylenovými) mostíky.
Vznikajú z hemu hemoglobínu a hemu iných zlúčenín napr myoglobin, Kataláza, cytochrom. Hlavným miestom vzniku žlčových farbív je slezina. Dochádza tu k štiepenie porfirinového jadra hemu medzi 1 a 2 pyrolovým kruhom, methinový mostík sa oxiduje na CO a odštěpí sa atóm železa. Vzniká tak prvý žlčové farbivo, zelený biliverdin. Ten je ešte v slezine redukovaný na bilirubín (žltá až rubínovo červená farba podľa koncentrácie). Bilirubín je krvou transportované do pečene, je vo vode nerozpustný a preto sa viaže na hydrofilné nosič albumín. Pečeň bilirubín z krvného obehu vychytají av pečeňovej bunke sa vytvorí estermi bilirubínu. Najviac esterov sa tvoria s k. glukuronovou a vznikajú tak mono-a di-glukuronid bilirubínu.
Tento proces sa nazýva konjugáciu a má za cieľ zabezpečiť rozpustnosť bilirubínu v H2O. Reakcie bilirubínu s k.glukuronovou je katalýzou enzýmom glukuronyltransferázou.

V krvi je vysoká koncentrácia nekonjugovaného bilirubínu

V krvi je vysoká koncentrácia nekonjugovaného bilirubínu
V krvi je vysoká koncentrácia nekonjugovaného bilirubínu, v moči bilirubín nie.
Pečeň vychytávajú niekoľko násobne viac bilirubínu ako normálne a v čreve vzniká nadmerné množstvo urobilinogenu. Jeho koncentrácia v portálna krvi presiahne vychytávacie schopnosti pečene a urobilinogen sa objaví v moči.
Ak je hemolýza veľká, nachádzame v sére zvýšenú aktivitu LD av krvnom obraze nárast počtu retikulocytů. Do tejto skupiny žloutenek patrí aj fyziologický ikterus novorodencov - okrem zvýšenej hemolytické sa na jeho vzniku podieľa aj nezrelosťou pečeňového tkaniva s neschopnosťou vychytat zvýšené množstvo bilirubínu.

Na rozdiel od predchádzajúcich príčin tu nevzniká nadmerné množstvo urobilinogenu a toto žlčové farbivo v moči nenájdeme.

Nekonjugované hyperbilirubinémie zapríčinené poruchou vychytávania bilirubínu a jeho konjugácie môže byť dedičná a označuje sa ako Gilbertův syndróm. Jedná sa o defektné funkciu pečeňových enzýmov, ktorá sa prehlbuje po fyzickej námahe, alebo pri hladovania a ktorej výsledkom je prechodné žltačka. Postihuje najčastejšie mladých mužov.
Pre svojich nositeľov je bez zdravotných následkov.

Typy hyperbilirubinémií:

Typy hyperbilirubinémií:
- Prehepatální - príčinou je nadmerný vznik bilirubínu pri zdravých pečeni (často je príčinou hemolýza)
- Hepatálne - pri poškodení pečeňovej bunky
- Posthepatální (obštrukčná) - príčinou je uzáver žlčových ciest

Porciovanie hyperbilirubinémií podľa typu bilirubínu nájdeného v krvi:
- Nekonjugované - zvýšená koncentrácia nekonjugovaného, nepriameho bilirubínu
- Zmiešané - v krvi je konjugovaný aj Nekonjugované
- Konjugované - vysoká koncentrácia konjugát, priameho bilirubínu v krvi

Hyperbilirubinémie Nekonjugované
Príčinou je zvýšený vznik bilirubínu, alebo porucha jeho vychytávania a konjugácie. Najčastejšou príčinou zvýšeného vzniku bilirubínu sú hemolytická anémia (vrodené, získané).
Z vrodených napr. anémia pri sférocytóze alebo hemoglobinopatiích. Zo získaných např.hemolýza po podaní inkompatibilní krvi, autoimúnne anémia alebo hemolytická choroba novorodenca.

Hyperbilirubinémie zmiešané

Hyperbilirubinémie zmiešané
Príčinou je poškodenie hepatocytov s poruchou vychytávania a konjugácia bilirubínu a porucha vylučovania konjugovaného bilirubínu do žlče. V krvi sa zvyšuje konc. nekonjugovaného bilirubínu i konjugovaného - ten preniká do moču. V moči je okrem bilirubínu aj urobilinogen, pretože poškodená pečeň nie je schopná vychytat všetok urobilinogen z portálna krvi. Poškodenie hepatocytov potvrdzuje zvýšená aktivita aminotransferáz AST a ALT v krvi, zvýšená aktivita LD a zvýš. konc. Fe v sére.
Obrázok:
Pri miernom poškodení pečeňovej bunky narastá v krvi aktivita amintransferázy ALT, AST stúpa len málo. pri ťažkom poškodení pečene je aktivita AST niekoľkonásobne vyššia ako ALT.
Výška aktivity ALT je úmerná počtu poškodených buniek. Príčina zmiešané hyperbilirubinémie - vírusovej hepatitídy, toxické poškodenie pečene (etanol, muchomůrka zelená, lieky atď)

LABORATÓRNE ZNÁMKY zhubného nádory

LABORATÓRNE ZNÁMKY zhubného nádory
Magnézium, fosfor, kalcium
VÁPNIK, Ca2 +

Vápnik spolu s fosforom tvoria základné minerálne súčasť kostí. Kostná Ca zabezpečuje mechanickú pevnosť kosti a umožňuje premenu (remodeláciu) kosti počas celého života. Ca v kostiach slúži aj ako pohotovostná zásoba pri jeho poklese v ECT.
Ca prijímame s potravou - 1 / 3 - ½ prijatého Ca sa vstrebe v horných partiách tenkého čreva. Zvyšok sa vylúči stolicou. Ca sa dostáva do moču procesom glomerulárnej filtrácie a 65% Ca podlieha následne spätné resorpciu. V plazme sa Ca vyskytuje v niekoľkých podobách. Menej ½ sa viaže na proteíny, hlavne na albumín. Tento Ca nepreniká bunkovými membránami a preto sa označuje ako nedifuzibilní. Malá časť Ca (niekoľko%) sa vyskytuje v krvi v podobe tzv kompletných zlúčenín, čo je väzba Ca sa zvyšky kyseliny citrónovej, mliečnej, uhličitej. Posledná časť plazmatického Ca asi ½ tvoria ionizovaný Ca = Ca2 +. Ionizovaný Ca je jedinou fyziologicky účinnou formou Ca. Spolu s komplexnými zlúčeninami Ca tvoria tzv difuzibilní Ca, ktorý preniká bunkovými membránami aj membránami dialyzačními.

Hyperbilirubinémie konjugovaná

Hyperbilirubinémie konjugovaná
Najčastejšou príčinou je lithiáza = kameň v žlčových cestách. Dochádza k blokáde odtoku žlče do duodena a konjugovaný bilirubín sa vracia do krvi. Z krvi sa dostáva do moču. Pri úplnom uzáveru žluč.cest sa do čreva nedostane žiadny bilirubín a nevzniká ani urobilinogen.
Výsledkom je popolavý šedá-acholická stolica.
V moči je negatívny nález urobilinogenu. V sére nachádzame zvýšenú aktivitu tzv obštrukčných enzýmov - GMT, ALP.

Stanovenie bilirubínu podľa Jendrassika - Grof
Bilirubín reaguje s diazotonovou k.sulfanilovou ce slabo kyslom prostredí za vzniku intenzívne sfarbeného roztoku azofarbivá vhodného na fotometrickému stanovenie. Celkový bilirubín (priamy aj nepriamy) sa stanovuje po pridaní roztoku akcelerátora (zrušia väzbu bilirubínu na albumín), priamy bilirubín sa stanovuje bez akcelerátora.
Akcelerátor môže byť kofeín alebo benzolan sodný.

Svetlo, vyššia teplota a dlhší skladovania môžu znížiť koncentráciu bilirubínu vo vzorke o 5-40%. Bilirubín preto vždy stanovujeme z čerstvého materiálu. Reakcia je tiež blokované vysokou hladinou vitamínu C a niektorými liekmi (barbituráty). Nadmernú koncentráciu znižuje aj hemolýza, pretože hemoglobín reaguje s diazočinidlem. Výsledky znižujú aj zvyšky saponátu v skúmavke.

Podiel ionizovaného Ca v krvi

Podiel ionizovaného Ca v krvi
Podiel ionizovaného Ca v krvi závisí od pH krvi, koncentrácia plazmatických bielkovín (hlavne albumínu) a na koncentráciu anorganického fosforu.
1. zvýšenie pH krvi = zníženie Ca2 +
2. zvýšenie koncentrácie anorganického fosforu = zníženie Ca2 +
3. zníženie bielkovín = zvýšenie Ca2 +

1.

2. pri vzostupe anorganického P sa zväčšuje ta časť plazmatického Ca, ktorá je naviazaná do komplexov - ionizovaný Ca klesá

3. pri strate plazmatických bielkovín ubývá nosič, na ktorý sa Ca môže nadviazať a hladina ionizovaného Ca rastie.

Význam Ca2 +:

Význam Ca2 +:
1. fyziologicky aktívnej je iba ionizovaný Ca. Znižuje nervosvalovou dráždivosť (tlmí pohotovosť ku kŕčom). Znižuje priepustnosť membrán a kapilárnych stien (využíva sa na liečbu alergií).
2. je potrebný pre činnosť svalov
3. je nevyhnutný pre hemokoagulácie
4. je súčasťou anorganické kostnej hmoty
5. je potrebný pre tvorbu materského mlieka

Riadenie metabolizmu Ca:
1. Vitamín D - môže byť exogénne (živočíšny alebo rastlinný) alebo endogénny (vznikajúce z cholesterolu a upravovaný v koži pôsobením UV žiarenia). Exogénne a endogénnou vitamín D musia byť ďalej v organizme transformovaný do aktívnej podoby. Túto premenu predstavuje dvojitú úprava steroidního jadra a ide o hydroxylácia (dvojaký hydroxylácia). Prvé hydroxylácia prebieha v pečeni a vzniká kalcitriol (25 - hydroxycholekalciferol). Kalcitriol je vlastným účinným vitamínom D. pôsobí predovšetkým na sliznici tenkého čreva a zvyšuje vstrebávanie Ca2 +.

Príčiny:

Príčiny:
- Hyperparathyreóza (nadvýroba Parathormón), môže byť primárna, ak je zvýšená tvorba spôsobená rastom nádoru prištítnych teliesok alebo ich zápalom. Poznáme aj sekundárne hyperparathyreózu, ktorá sprevádza zlyhanie obličiek - v tomot prípade sa totiž netvorí kalcitriol a vázne vstrebávanie Ca z čreva. V krvi je nízka hladina ionizovaného Ca a to vyvolá zvýšenú produkciu Parathormón, čím dochádza k odvápňovania kostí.
- Liečebne sa u pacientov sa selhávajícími obličkami podáva umelo pripravený kalcitriol, ktorý preruší tento "začarovaný kruh".
K ďalším príčinám hyperkalcémie patria zvýšené uvoľňovanie Ca z kostí u dlhodobo znehybněných pacientov, pri rozsiahlych úrazoch a nádoroch kostí.

Hypokalcémia - hodnoty Ca pod 2,4 mmol / l.
Hlavným prejavom je sklon ku kŕčom.
Príčinou môže byť nedostatok vitamínu D pri poruche jeho vstrebávanie alebo nedostatočnom prívode v potrave, pri nedostatočnej endogénnou tvorbe, pri nedostatku UV žiarenia. Ďalšou príčinou môže byť nedostatočná produkcia Parathormón napr. po chirurgických operáciách na štítnej žľaze. Príčinou môžu byť aj zvýšené nároky na Ca v tehotenstve a počas dojčenia. Tiež všetky stavy spojené s alkalémií vedú k zníženiu hladiny ionizovaného Ca.

Parathormón

2. Parathormón - je peptidický hormón tvorený prištítnou telieskami. Impulzom pre jeho tvorbu je pokles plazmatickej koncentrácie ionizovaného Ca. Parathormón pôsobí priamo na kosti a podporuje vyplavovanie Ca2 + z kostí, čím sa zvýši koncentrácia ionizovaného Ca v krvi. Pôsobí aj na TUBUL obličiek a bránia spätnej resorpciu fosfátov, bráni tak tvorbe komplexov viazaného Ca2 + av krvi je viac Ca2 +.
3. Kalcitonín je hormón tvorený určitými bunkami - parafolikulární bunky štítnej žľazy. Podnetom pre jeho tvorbu je zvýšená koncentrácia ionizovaného Ca2 + v krvi. Podporuje ukladanie Ca2 + do kosti a tým znižuje koncentráciu Ca (plazmatického).

Kalcitonín z uvedených 3 faktorov pre reguláciu Ca má najmenšie význam.

Hyperkalcémie = zvýšená hladina Ca v krvi (nad 2,4 mmol / l). prejavuje sa zvýšeným sklonom k tvorbe močových kameňov (najmä z oxalátu vápenatého), zápchou, zvracaním, únavnosť a chorobné spavosť.

Magnesium, Mg

Magnesium, Mg
Mg je prevažne nitrobuněčný katión a väčšina jeho zásob je uložená v kostnej tkanive. V ECT sú menej ako 2% telesného Mg.
Mg prijímame v potrave iba 1 / 3 takto prijatého Mg sa vstrebe, zvyšok sa vylúči stolicou a močom.
Mg podlieha glomerulárnej filtrácii - takmer 95% sa ho z primitivní moči opäť resorbuje.
Rozloženie Mg v plazme sa delí na:
- Mg viazaný na bielkoviny (albumín) 1 / 3
- Mg ionizovaný - 55 - 60% celkového Mg v plazme
- Mg viazaný do komplexov
Fyziologicky účinnú formu predstavuje iba ionizovaný Mg
Koncentrácia celkového Mg v plazme 0,8 - 1,1 mmol / l.
V našej populácii je skôr sklon k hypomagneziémia, protže množstvo Mg v rastlinnej a živočíšnej potrave je nízke.

Význam Mg pre organizmus:
- Je potrebný pre správnu funkciu mnohých enzýmov a enzymatických systémov
- Podporuje fibrinolýzy
- Je dôležitý pre tvorbu Parathormón
- Znižuje nervosvalovou dráždivosť (tlmí sklon ku kŕčom
- Tlmí proces kryštalizácie a agregovania kryštálov pri tvorbe močových kameňov (bráni ich vzniku)

Vlastnosti Mg podobné K:

Vlastnosti Mg podobné K:
- Intracelulárnu katión
- Jeho koncentrácia v plazme stúpa pri zlyhaní obličiek a pri poklese pH krvi
- Zvýšené straty močom spôsobujú diuretiká a nadprodukcie aldosteronu.

Fosfor, P
Normálne hodnoty: 0,7 - 1,6 mmol / l - dospelí, do 2,2 mmol / l - deti.
Je dôležitou súčasťou minerálne kostného tkaniva, je obsiahnutý v životne dôležitých zlúčeninách ako sú NK, makroerginfosfáty (ATP), koenzýmu.
Nájdeme ho v každej jadrovej bunke ľudského tela. Je dôležitý pre metabolizmus cukrov (esterifikácie, glykolýza).
Tvorí jeden z nárazníkových systémov krvi.

Hyperfosfatémie - vyššia hladina plazmatického fosforu. Je fyziologická u detí v čase rastu. Patologická je pri zlyhaní obličiek, pri nedostatočnej produkcii parathormón, ktorý bráni spätné resorpciu fosfátov.
Hypofosfatémie - nízka hladina fosforu v krvi. Môže nastať u nadvýroba Parathormón alebo k nej môže dôjsť po inuzi glukózy.

Hypermagnesémie

Hypermagnesémie
- Najzávažnejším prejavom je porucha srdcového rytmu až zástava srdcovej činnosti a útlm CNS (apatia, chorobné spavosť)
Príčiny: zlyhanie obličiek, nekontrolovateľný prísun Mg pri porušenej fci obličiek, acidémie
Hypomagneziémia - hlavným prejavom sú kŕče, ktoré nereagujú na podávanie Ca.
Príčiny: dlhodobý nedostatok Mg v potrave, porucha jeho vstrebávanie, zvýšené straty močom (po liekoch), alebo zvýšené straty sekréty GIT.
Zdroj Mg v strave: mliečne výrobky, mäso, vaječný žĺtok, obilniny, strukoviny, orechy.

Vlastnosti Mg podobné Ca:
- Rozdelenie v plazme
- Veľký podiel v kostiach
- Pokles koncentrácie v sére pri vzostupe pH krvi
- Ovplyvnenie plazmatickej hladiny parathyrinem (zvýšenie)

DIABETES MELLITUS A oGTT

DIABETES MELLITUS A oGTT
Delí sa na 2 základné skupiny:
DM 1. typu
DM 2.typu

1. typu - postihuje prevažne mladých ľudí, preto sa mu predtým říkalo mladých alebo detský. IDDM - inzulín dependentný DM. Začiatok býva najčastejšie medzi 13 - 15 rokom. Ide o poruchu tvorby inzulínu, ktorá je spôsobená postupným zničením β - buniek Langerhansových ostrovčekov. Najčastejšie príčinnú je tvorba Ab proti týmto bunkám v rámci autoimunitního procesu. Vyvolávajúcim momentom môže byť obyčajná viróza, bežné detské choroby (rubeola), herpetické vírusy (plané neštovice).
Diabetici 1. typu majú sklon k častým poruchám vnútorného prostredia (k tzv ketoacidóza - klesá pH krvi, výrazné zvýšenie ketolátek v krvi, ketré vznikajú z MK).

Včasné komplikácie

Včasné komplikácie
- Sú dané prudkým nárastom alebo poklesom glykémie. Vzostup glykémie je sprevádzaný diabetická ketoacidóza s poruchou vedomia, vracaním, rýchlym a hlbokým dýchaním (Kusmaullovo dýchania). V dychu je cítiť acetón, pokožka je suchá a ružová.
Príčinou je diétna chyba alebo opomenutie aplikácie inzulínu.
Prudký pokles glykémie sa prejaví tzv hypoglykemickým kóme s poruchou vedomia, potením, bledosť, kŕčmi. Pacient často budí dojem opitosti.
Príčinou je predávkovania inzulínom alebo aplikácie inzulínu a opomenutia jedla, telesná námaha alebo insekt.

Neskoré komplikácie - sú cievne a spočívajú v zužovaniu průsvitu malých i veľkých ciev - mikroangiopatie a makroangiopatie. Poškodenie ciev sa týka predovšetkým sietnice, obličiek, dolných končatín, srdca a mozgu.

Cukrovka druhého typu

2. typu
2. typu - postihuje väčšinou starší ľudia, preto sa mu hovorí DM dospelých, stareckej, Nidda - noninzulindependentní DM. Príčinou je rezistencia tkanív k inzulínu prípadne relatívny nedostatok inzulínu pri zníženie počtu receptorov pre inzulín v periférnych tkanivách.
K zníženiu počtu periférnych receptorov pre inzulín dochádza najmä u obéznych pacientov
(9 z 10). Tento typ cukrovky súvisí so zvýšením energetického príjmu a znížením telesnej aktivity. Je tu výrazne vyjadrená dedičnosť. Začiatok býva najčastejšie po 45 roku života. DM 2. typu býva často súčasti metabolického syndrómu. 90% všetkých diabetikov má DM 2. typu.

Prvými prejavy cukrovky bývajú polyurie, glykosurie, hyperglykémia, smäd, dehydratácia a minerálový rozvrat. Telo nie je schopné využiť glukózu a preto odbúrava mastné kyseliny za vzniku ketolátek. Hromadením ketolátek dochádza k acidifikácii vnútorného prostredia a rozvíja sa porucha ABR. V priebehu ochorenia je pacient ohrozený komplikáciami, ktoré sa delia na skoré a neskoré.

LABORATÓRNE DIAGNOSTICKÉ diabēta o GTT

LABORATÓRNE DIAGNOSTICKÉ diabēta o GTT
DM je potvrdený, ak má pacient klinické prejavy cukrovky a aspoň 2x po sebe hodnotu glykémie nalačno nad 7 mmol / l (u plnej krvi) alebo nad 8 mmol / l (v sére). Ak nie je nález jednoznačný (glykémie je vyššia ako horná hranica, ale nepresahuje 7 mmol / lv krvi alebo 8 mmol / lv sére). Potom vykonávame o GTT.
Tento test hodnotí schopnosť organizmu vyrovnať sa so záťažou vyvolanou podaním nálože glycidov. Vyšetrované osoba 3 dni pred testom jej normálnu stravu bez obmedzení sacharidov. Po 12 hodinovom lačnění sa pacientovi odoberie krv - najčastejšie kapilárnu z bruška prsta (čas 0), potom pacient vypije čaj sa 75g glukózy. Ďalšie krv sa odoberá hodinu a dve hodiny po vypití čaju (1. a 2.). Počas testu pacient nejí, nepije, nefajčí a je v kľude. Za 1 hodinu po vypití čaju dosiahne glykémie svojho maxima, ale nemá byť vyššia ako 11 mmol / l. Za ďalšiu hodinu by sa glykémie mala vrátiť na hodnotu v čase 0. Ak sú výsledky o GTT vyššie ako uvedené hodnoty, jedná sa o poruchu tolerancie glukózy v organizme. Test sa nemá vykonať u už potvrdených diabetikov, u průjmovitých ochorenia, kedy by nedošlo k resorpciu glukózy v čreve a tráviace ťažkosti by sa ešte zhoršili. o GTT sa nesmie tiež vykonávať u akútnych stavov ako je IM. Ak nemožno uskutočniť o GTT dôsledku ochorenia tráviaceho traktu je alternatívou podania glukózy do žily v rámci intravenózního GTT.

Kreatinínu

Kreatinínu
Vzniká z kreatinfosfátu a kreatínu (odtržením 1 molekuly H2O) - je to teda anhydrit kreatínu.
Môže byť:
- Endogénnou - z priečne pruhovaného kostrových svalov
- Exogénne z potravy
Zvyčajne ho stanovujeme v sére a v moči. Do moču sa vylučuje procesom glomerulárnej filtrácie a pri priechode TUBUL sa už nemení. Výnimkou je stav, keď je v krvi vysoká koncentrácia kreatinínu, potom dochádza k nepatrnej tubulárnej sekréciu.
Fyziologické rozmedzí pre kreatinín v sére:
Muži 50 - 120 μmol / l
Ženy 40 - 110 μmol / l
Hodnoty kreatinínu v sére sú u mužov vyššia než u žien a detí. Súvisí to s priečne pruhovanými kostrovom svaly.
Fyziologické rozmedzí pre kreatinín v moči:
9 - 16 mmol/24 hodín

Hladina močoviny v sére závisí na:

Hladina močoviny v sére závisí na:
- Príjmu bielkovín (u ľudí s poškodenou funkciou obličiek sa odporúča nebielkovinovej dieta)
- Odbúravanie bielkovín, ktoré sa zvyšuje pri horúčke, po operáciách, úrazoch, krvácanie do GIT
- Funkciu obličiek (pri porušenej funkcii obličiek sa hladina urey v sére zvyšuje)
- Stave pečene (u ťažkých hepatopatů sa koncentrácia urey v sére znižuje)
- Zavodnení organizmu (pri dehydratáciu sa jej koncentrácia v krvi zvyšuje)
Metódy stanovenia urey:
1. podľa Kjeldahla - jedná sa o stanovenie urey na základe znalosti koncentrácia jej dusíka - zdĺhavé - nepoužíva sa.
2. chemickej
- So diacetylmonoximem
- So OTA (o - ftaldialdehyd)
3. enzymatické
- So ureázou
- So glutamátdehydrogenázou

Hladina kreatinínu v krvi

hladina kreatinínu v krvi
hladina kreatinínu v krvi je ovplyvnená objemom svalovej hmoty, stavom obličiek (pri porušenej funkcii obličiek kreatinín v krvi stúpa), úrazy a ochoreniami priečne pruhovaných svalov, extrémnu svalovú námahou alebo kŕčmi. Hladina v sére je nepatrne tiež ovplyvnená množstvom bielkovín v potrave.
Koncentrácia močoviny, kreatinínu a draslíka v krvi je Kritériom pre posúdenie nutnosti napojiť pacienta na umelú obličku:
Urea v sére viac ako 30 mmol / l
Kreatinín v sére viac ako 1000μmol / l
Draslíka v sére viac ako 6,0 mmol / l

MO20

UREA a amoniaku

UREA
Dusíkaté produkt odbúravaniu bielkovín, vzniká z amoniaku v pečeni. Je vylučovaná obličkami. V tubuloch čiastočne podlieha spätnej resorpciu. Dusík urey tvoria 83% všetkého dusíka v moči a tiež tvoria ½ neproteinového dusíka vo všetkých telesných tekutinách.
Urea v sére: 2,5 - 8,3 mmol / l
Urea v moči: 330 - 580 mmol / deň

AMONIAKU

AMONIAKU
Produkt odbúravaniu bielkovín a AMK. Vzniká v pečeni, kde sa z neho tvorí močovina. Za fyziologických podmienok je v krvi len v stopových koncentráciách. Jeho koncentrácia by krvi sa zvyšuje u ťažké poruchy pečene - musí byť zničený 90% pečeňového tkaniva napr. cirhóza pečene (alkoholická hepatitída) alebo po liekovej poškodeniu hlavne u detí. Tiež sa zvyšuje po krvácanie do GIT.
Amoniak je bunkový jed, ktorý vo vysokých koncentráciách pôsobí ťažké poruchy psychiky a vedomie. Odber na stanovenie amoniaku sa vykonáva do protisrážlivého činidlá a skúmavka sa transportuje v ľadová triešť. Krv sa musí spracovať do 10 minút inak koncentrácia amoniaku stúpa v dôsledku štiepenia AMK. Dôležitá je tiež čistota odberových nádobiek a prostredie - súčasne sa v rovnakej miestnosti nesmie pracovať s močom, ktorá obsahuje vysokú koncentráciu čpavku.

Pacient trpiaci dnou

2. stredoškolské
2. sekundárne - sprevádza liečbu cytostatík, čo sú lieky používané na liečbu zhubných nádorov alebo môže byť spôsobená insuficienciou obličiek.
Pacient trpiaci dnou musia sržet diétu s vylúčením mäsa mladých zvierat, vnútorností a alkoholu. Je častejšia u mužov, zvyčajne začína v strednom veku (40 rokov) a je možné u nej vysledovať rodinný výskyt.
Podľa posledných výskumov je kyselina močová tiež významným antioxidačným činidlom v boji organizmu s toxickými voľnými kyslíkovými radikálmi (jedovaté zlúčeniny kyslíka, ktorým chýba jeden elektrón a ktoré poškodzujú okolité tkanivá, podieľajú sa napríklad na vývoji aterosklerózy).

Kyseliny močovej

Kyseliny močovej
Je to konečný produkt odbúravania purínových báz nukleových kyselín (= adenin a guanín). Tvorí sa v pečeni a vylučuje sa prevažne močom.
Kyselina močová:
- Endogénnou - z vlastných nukleových kyselín
- Exogénne - z potravy (mäsité zložky potravy - mäso z mladých zvierat, vnútornosti)
Hodnoty:
Muži v sére do 420 μmol / l
Ženy v sére do 320 μmol / l
U detí sú hodnoty fyziologicky nižšia
V moči 1,5 - 4,5 mmol / 24 hodín
Zvýšená hladina kyseliny močovej v sére = hyperurikémia:
- Němá - bez klinických príznakov a prejavov
- S klinickými prejavmi = dna - hlavným prejavom dni je bolesť malých kĺbov a najmä kĺbu palca u nohy. Kĺb je zarudlý, Opuchnutá na dotyk bolestivý. V kĺbovej dutine sa nájdu kryštáliky kyseliny močovej, ktoré sa môžu ukladať aj v iných tkanivách a týmto ložiskům říkáme dnové tofy môže byť: 1. primárnej (asi 90%) - genetické dispozície k hyperurikémia

METABOLICKÉ ALKALÓZA

METABOLICKÉ ALKALÓZA
Vzniká nahromadením alkalickú alebo stratou kyslých metabolitov.
Príčiny:
1. metabolickej alkalózy spôsobené stratami Cl -
- Chloridy sa můžou ztrácet žalúdočnou šťavou pri opakovanom vracanie alebo pri opakovanom odsávanie žalúdočných štiav (pri otravách)
- Môžu sa strácať aj močom, najčastejšie pri podávaní tzv diuretík (lieky zvyšujúce tvorbu moču a znižujú tlak)
- Straty Chloridové anion z organizmu sú nahrádzané zadržiavaniu HCO3-(hydrogénuhličitanov)
2. z hormonálnych príčin - z nadmernej tvorby hormónov kôry nadobličiek ladosteronu, ktorý zvyšuje straty draslíka do moču. Spolu s draslíkom sa stráca aj Cl-a H +. Príčinou nadvýroba aldosteronu môže byť nádor alebo zápalové ochorenie v oblasti kôry nadobličiek.

LABORATÓRNE OBRAZ MAL

LABORATÓRNE OBRAZ MAL
- Zvýšené pH (u akútne poruchy)
- Zvýšená koncentrácia HCO3 -
- Zvýšené hodnoty base exces (kladné hodnoty)
- Znížená koncentrácia K + v sére
- Znížená koncentrácia ionizovaného Ca2 + v sére
MO 22
CLEARENCE endogénneho kreatinínu

Clearence je objem plazmy, ktorý sa pri jednom prietoku obličkami za jednu časovú jednotku očistí od sledovanej látky. Je to test, ktorý slúži k odhadu glomerulárnej filtrácie:

P. GF + T = U. V

P. . . koncentrácia prešetrované látky v plazme
GF. . . glomerulárnej filtrácie
T. . . tubulárnej resorpcie a sekrécie látky (kreatinín = 0)
U. . . koncentrácia látky v moči
V. . . objem moču (ml / s)

P. GF = U. V → GF =
Normálna hodnota GF: 1,3 - 3,3 ml / s

Metabolické alkalózy

Metabolické alkalózy
3. metabolickej alkalózy zo strát albumínu - je záporne nabitý a miesto neho sa zadržujú HCO3-. Pokles koncentrácie albumínu v krvi môže byť spôsobený:
- Nedostatočnou tvorbou v pečeni
- Nedostatočným prísunom v potrave u podvyživených ľudí
- Zvýšenou stratou do moču u ochorení obličiek
- Presunom do mezibuněčných priestor pri zlyhaní srdca

KOMPENZÁCIA MAL
Kompenzácia sa deje respiračné cestou tým, že Dechy sú mělce, riedši, čím dochádza k zadržiavaniu kyslého CO2. táto kompenzácia je nedokonalá, pretože dychové centrum veľmi citlivo reaguje na vzostup pCO2 a pokles pO2 v krvi a veľmi rýchlo je stimulovanie k ďalšej činnosti - pľúca pracujú opäť normálne.

KLINICKÁ OBRAZ MAL
- Poruchy srdcového rytmu (spôsobené nízkou koncentráciou draslíka)
- Sklon ku kŕčom (z nízkej hladiny vápnika)
- Nechutenstvo
- Vracanie

Výsledky GF

Výsledky GF
Výsledky GF sa líši podľa veku a pohlavia. Clearence je senzibilitu ukazovateľom poškodenia obličiek ako samotný kreatinín v sére. Pre možnosť lepšieho porovnaní sa hodnota skorigujte ma ideálny telesný povrch

Povrch tela (S) =. 0,0167
Aktuálna telesný povrch pacienta sa buď počíta podľa vzorcov alebo odpočítava z tabuliek a nomogramov.

GFkorig =. 1,73
K výpočtu glomerulárnej filtrácie sa v experimente používa ešte tzv inulínový clearence. Insulin je polysacharid. Je to cudzie látka, ktorá sa do organizmu privádza infúziou - ako cudzie látka môže vyvolávať alergické reakcie a iné prejavy neznášanlivosti. Výnimočne sa používa aj fruktóza.

Normálne hodnoty: 0,98 - 0,99 (98 - 99%)

Normálne hodnoty: 0,98 - 0,99 (98 - 99%)
U väčšiny látok je množstvo profiltrované v glomeruloch ďalej upravované v tubulárním systému resorpcií alebo sekréciou. Platí vzťah, že profiltrované množstva (GF) sa rovná súčtu množstva vylúčeného (FE = frakčnou exkrécie) a vstřebaného v tubuloch (TR).

GF = FE + TR
Ak tento vzťah vyjadríte v relatívnych číslach FE + TR = 1 (100%)
Tabuľkové resorpcie látky je taký podiel z množstva profiltrovaného v glomeruloch, ketré sa vstrebe v tubuloch.
FE = frakčnou vylučovania látky je takýto podiel danej látky z množstva profiltrovaného v glomeruloch, ktorý je za časovú jednotku vylúčený v definitívnej moču. FE danej látky sa rovná podielu jej clearence a GF
Výpočet FE:
V praxi sa sleduje zvyčajne len jeden z uvedených tubulárnych ukazovateľov. Zvyčajne je to frakčnou vylučovania. Ak je jeho hodnota vyššia ako 1,0 (100%) znamená to, že sa táto látka v tubuloch viac secernuje ako resorbuje (tzn. Že v definitívnej moču je sledované látky viac ako v moči primitivní). Je-li FE nula je látka v tubuloch kompletne resobována. Ak FE = 1,0 zodpovedá vylúčené množstvo sledované látky množstvo profiltrovanému. U väčšiny bežne vylučovaných látok známe presné rozmedzí FE týchto látok, ktoré by za fyziologických okolností nemala byť prekročená.
Výhodou výpočte FE je, že nepotrebujeme poznať diuréza, čím odpadá zber moču pacintem

Príprava pacienta na clearence:

Príprava pacienta na clearence:
Pacient zbiera moč najčastejšie po dobu 24 hodín. Moč sa uchováva v chlade a po skončení zberu sa s presnosťou na ml zmeria jej objem. Ten sa zapíše na sprievodku. Celý objem moču sa dôkladne premieša a pre laboratórium sa odli asi 10 ml. Pacientovi sa ďalej odoberá krv na stanovenie koncentrácie kreatinínu. Na sprievodku sa ďalej uvedie údaj o hmotnosti, výške, pohlavia a veku. Počas zberu moču sa pacient nesmie fyzicky namáhať a mal by prijímať primerané množstvo stravy a nápojov. Mal by sa používať len nevyhnutne potrebné lieky.

Iné spôsoby odhadu GF:
Pri znížení GF sa v plazme hromadia rad nízkomolekulových proteínov, ktoré sa za fyziologických okolností touto cestou vylučujú do moču (β2 - mikroglobulin, C - peptid). V súčasnej dobe sa najčastejšie stanovuje v krvi koncentrácia cystatinu C, ktorý sa zvyšuje úmerne poklesu GF. Na rozdiel od iných nízkomolekulových proteínov nie je tumorovým ani zápalovým markér. Stanovenie je imunochemickou.
Na základe získaných čísiel sa môže vypočítať tubulárnej resorpcie vody a môžu sa tak zhodnotiť aj renálna tubulárna funkcie
TR =